中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2010年
8期
1540-1544
,共5页
刘鲁豫%王燕萍%王林曦%刘小莺%唐莉%刘晓红%刘礼斌
劉魯豫%王燕萍%王林晞%劉小鶯%唐莉%劉曉紅%劉禮斌
류로예%왕연평%왕림희%류소앵%당리%류효홍%류례빈
第三丁基过氧化氢%氧化性应激%内质网应激%细胞凋亡%人脐静脉内皮细胞
第三丁基過氧化氫%氧化性應激%內質網應激%細胞凋亡%人臍靜脈內皮細胞
제삼정기과양화경%양화성응격%내질망응격%세포조망%인제정맥내피세포
目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立体外氧化应激的细胞凋亡模型,观察氧化损伤对内皮细胞内质网应激(ER stress)相关蛋白表达的影响.方法:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h,MTT法观察t-BHP作用后细胞的存活率;Hoechst/PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Western blotting检测ER应激标志物肌醇需求激酶1α(IRE1α)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况.结果:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h后,发现随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,细胞活力逐渐下降;不同浓度t-BHP处理8 h后,t-BHP大于25μmol/L时,细胞凋亡率明显增加(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P＜0.05);ER应激相关信号蛋白IRE1α、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及凋亡蛋白caspase-3表达增加.结论:氧化应激可导致内皮细胞发生凋亡,可能与引起内质网应激相关信号蛋白的表达有关.
目的:通過第三丁基過氧化氫(t-BHP)誘導人臍靜脈內皮細胞(HUVECs),建立體外氧化應激的細胞凋亡模型,觀察氧化損傷對內皮細胞內質網應激(ER stress)相關蛋白錶達的影響.方法:不同濃度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)誘導HUVECs 1-24 h,MTT法觀察t-BHP作用後細胞的存活率;Hoechst/PI染色熒光顯微鏡觀測細胞凋亡形態;Western blotting檢測ER應激標誌物肌醇需求激酶1α(IRE1α)、c-Jun氨基末耑激酶(JNK)及凋亡蛋白半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3(caspase-3)的錶達情況.結果:不同濃度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)誘導HUVECs 1-24 h後,髮現隨著t-BHP作用濃度的增加和時間的延長,細胞活力逐漸下降;不同濃度t-BHP處理8 h後,t-BHP大于25μmol/L時,細胞凋亡率明顯增加(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P＜0.05);ER應激相關信號蛋白IRE1α、燐痠化c-Jun氨基末耑激酶(p-JNK)及凋亡蛋白caspase-3錶達增加.結論:氧化應激可導緻內皮細胞髮生凋亡,可能與引起內質網應激相關信號蛋白的錶達有關.
목적:통과제삼정기과양화경(t-BHP)유도인제정맥내피세포(HUVECs),건입체외양화응격적세포조망모형,관찰양화손상대내피세포내질망응격(ER stress)상관단백표체적영향.방법:불동농도t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)유도HUVECs 1-24 h,MTT법관찰t-BHP작용후세포적존활솔;Hoechst/PI염색형광현미경관측세포조망형태;Western blotting검측ER응격표지물기순수구격매1α(IRE1α)、c-Jun안기말단격매(JNK)급조망단백반광안산천동안산단백매3(caspase-3)적표체정황.결과:불동농도t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)유도HUVECs 1-24 h후,발현수착t-BHP작용농도적증가화시간적연장,세포활력축점하강;불동농도t-BHP처리8 h후,t-BHP대우25μmol/L시,세포조망솔명현증가(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P＜0.05);ER응격상관신호단백IRE1α、린산화c-Jun안기말단격매(p-JNK)급조망단백caspase-3표체증가.결론:양화응격가도치내피세포발생조망,가능여인기내질망응격상관신호단백적표체유관.
