中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2010年
11期
839-843
,共5页
尹龙勃%尹文玲%叶伟成%孙学强%杨鸣琦%王一成%袁秀芳%张存
尹龍勃%尹文玲%葉偉成%孫學彊%楊鳴琦%王一成%袁秀芳%張存
윤룡발%윤문령%협위성%손학강%양명기%왕일성%원수방%장존
牛Ⅰ型疱疹病毒%感染性克隆%Red E/T重组%囊膜蛋白gN%囊膜蛋白gE
牛Ⅰ型皰疹病毒%感染性剋隆%Red E/T重組%囊膜蛋白gN%囊膜蛋白gE
우Ⅰ형포진병독%감염성극륭%Red E/T중조%낭막단백gN%낭막단백gE
为构建gE基因缺失的牛Ⅰ型疱疹病毒(BHV1),本研究在BHV1全基因组感染性细菌人工染色体克隆pBHV1-ZJ的基础上,利用Red E/T重组技术,分别构建了gE基因缺失、gE和gN双基因缺失的pBHV1突变体,通过转染获得了重组病毒rBHV1-△gE,而双基因缺失突变体pBHV1-△gN-△gE则未能观察到细胞病变.病毒噬斑大小和生长曲线试验表明,在感染细胞内和培养基中,rBHV1-△gE滴度与亲本毒株BHV1无明显差异,而rBHV1-△gN显著降低;重组病毒rBHV1-△gE和前期构建的rBHV1-△gN形成的噬斑均显著小于亲本病毒,其大小分别为亲本病毒的18%和64%.rBHV1-△gE和rBHV1-△gN的构建将有助于阐明gE与gN协同作用机制和为研制BHV1新型基因标记疫苗奠定基础.
為構建gE基因缺失的牛Ⅰ型皰疹病毒(BHV1),本研究在BHV1全基因組感染性細菌人工染色體剋隆pBHV1-ZJ的基礎上,利用Red E/T重組技術,分彆構建瞭gE基因缺失、gE和gN雙基因缺失的pBHV1突變體,通過轉染穫得瞭重組病毒rBHV1-△gE,而雙基因缺失突變體pBHV1-△gN-△gE則未能觀察到細胞病變.病毒噬斑大小和生長麯線試驗錶明,在感染細胞內和培養基中,rBHV1-△gE滴度與親本毒株BHV1無明顯差異,而rBHV1-△gN顯著降低;重組病毒rBHV1-△gE和前期構建的rBHV1-△gN形成的噬斑均顯著小于親本病毒,其大小分彆為親本病毒的18%和64%.rBHV1-△gE和rBHV1-△gN的構建將有助于闡明gE與gN協同作用機製和為研製BHV1新型基因標記疫苗奠定基礎.
위구건gE기인결실적우Ⅰ형포진병독(BHV1),본연구재BHV1전기인조감염성세균인공염색체극륭pBHV1-ZJ적기출상,이용Red E/T중조기술,분별구건료gE기인결실、gE화gN쌍기인결실적pBHV1돌변체,통과전염획득료중조병독rBHV1-△gE,이쌍기인결실돌변체pBHV1-△gN-△gE칙미능관찰도세포병변.병독서반대소화생장곡선시험표명,재감염세포내화배양기중,rBHV1-△gE적도여친본독주BHV1무명현차이,이rBHV1-△gN현저강저;중조병독rBHV1-△gE화전기구건적rBHV1-△gN형성적서반균현저소우친본병독,기대소분별위친본병독적18%화64%.rBHV1-△gE화rBHV1-△gN적구건장유조우천명gE여gN협동작용궤제화위연제BHV1신형기인표기역묘전정기출.
