基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
7期
740-745
,共6页
智深深%田杰%刘官信%鲁荣%林建萍%刘建平%朱静
智深深%田傑%劉官信%魯榮%林建萍%劉建平%硃靜
지심심%전걸%류관신%로영%림건평%류건평%주정
慢病毒表达载体%Islet-1%干细胞特异性分化%心肌样细胞
慢病毒錶達載體%Islet-1%榦細胞特異性分化%心肌樣細胞
만병독표체재체%Islet-1%간세포특이성분화%심기양세포
目的 研究Islet-1对干细胞分化的影响.方法 用PCR钓取目的 基因,将目的 基因与pLenO-WPI载体连接,选取阳性质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞生产出慢病毒载体.感染C3H10T1/2细胞,实时荧光定量PCR及Western blot检测Islet-1和心肌、肝脏、骨骼及神经各系统相关标志物的表达,免疫荧光检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达部位.结果 PCR及测序显示目的 片段正确插入,实验组有Islet-1表达;心肌早期发育相关基因GATA-4、MEF2C、NKx2.5在检测到荧光蛋白1周后升高,2周到达高峰,3周后可检测到心肌特异性蛋白cTnT(0.582±0.0576),其时序性表达呈随时间增强趋势;cTnT表达于胞质;肝脏系统特异性标志AFP及ALB、骨骼系统特异性标志BGP及BALP、神经系统特异性标志Nestin及GFAP均未表达.结论 Islet-1具有特异性促进干细胞向心肌样细胞分化的作用.
目的 研究Islet-1對榦細胞分化的影響.方法 用PCR釣取目的 基因,將目的 基因與pLenO-WPI載體連接,選取暘性質粒,與輔助質粒共同感染293T細胞生產齣慢病毒載體.感染C3H10T1/2細胞,實時熒光定量PCR及Western blot檢測Islet-1和心肌、肝髒、骨骼及神經各繫統相關標誌物的錶達,免疫熒光檢測心肌肌鈣蛋白T(cTnT)錶達部位.結果 PCR及測序顯示目的 片段正確插入,實驗組有Islet-1錶達;心肌早期髮育相關基因GATA-4、MEF2C、NKx2.5在檢測到熒光蛋白1週後升高,2週到達高峰,3週後可檢測到心肌特異性蛋白cTnT(0.582±0.0576),其時序性錶達呈隨時間增彊趨勢;cTnT錶達于胞質;肝髒繫統特異性標誌AFP及ALB、骨骼繫統特異性標誌BGP及BALP、神經繫統特異性標誌Nestin及GFAP均未錶達.結論 Islet-1具有特異性促進榦細胞嚮心肌樣細胞分化的作用.
목적 연구Islet-1대간세포분화적영향.방법 용PCR조취목적 기인,장목적 기인여pLenO-WPI재체련접,선취양성질립,여보조질립공동감염293T세포생산출만병독재체.감염C3H10T1/2세포,실시형광정량PCR급Western blot검측Islet-1화심기、간장、골격급신경각계통상관표지물적표체,면역형광검측심기기개단백T(cTnT)표체부위.결과 PCR급측서현시목적 편단정학삽입,실험조유Islet-1표체;심기조기발육상관기인GATA-4、MEF2C、NKx2.5재검측도형광단백1주후승고,2주도체고봉,3주후가검측도심기특이성단백cTnT(0.582±0.0576),기시서성표체정수시간증강추세;cTnT표체우포질;간장계통특이성표지AFP급ALB、골격계통특이성표지BGP급BALP、신경계통특이성표지Nestin급GFAP균미표체.결론 Islet-1구유특이성촉진간세포향심기양세포분화적작용.
