宁夏大学学报（自然科学版）
寧夏大學學報（自然科學版）
저하대학학보（자연과학판）
2011年
2期
164-167
,共4页
克隆与表达%超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)%抗体效价
剋隆與錶達%超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)%抗體效價
극륭여표체%초엄보β-내선알매(ESBLs)%항체효개
利用PCR技术扩增了SHV-12 ESBLs目的基因,并将目的基因亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-SHV-12转化于表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳分析.结果表明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相对分子质量为30 KDa,经蛋白质印迹检测证明具有特异性条带,经头孢硝基噻吩显色反应表明获得了有活力的ESBLs,包涵体作为免疫抗原免疫Balb/c小鼠,3次免疫后利用间接ELISA法测定免疫效价达到1:106.获得了可靠而稳定的免疫原.
利用PCR技術擴增瞭SHV-12 ESBLs目的基因,併將目的基因亞剋隆到錶達載體pET-28a(+)中,穫得重組質粒pET-28a-SHV-12轉化于錶達菌株BL21(DE3)中誘導錶達,錶達蛋白純化後經SDS-PAGE電泳分析.結果錶明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相對分子質量為30 KDa,經蛋白質印跡檢測證明具有特異性條帶,經頭孢硝基噻吩顯色反應錶明穫得瞭有活力的ESBLs,包涵體作為免疫抗原免疫Balb/c小鼠,3次免疫後利用間接ELISA法測定免疫效價達到1:106.穫得瞭可靠而穩定的免疫原.
이용PCR기술확증료SHV-12 ESBLs목적기인,병장목적기인아극륭도표체재체pET-28a(+)중,획득중조질립pET-28a-SHV-12전화우표체균주BL21(DE3)중유도표체,표체단백순화후경SDS-PAGE전영분석.결과표명,목적단백SHV-12 ESBLs상대분자질량위30 KDa,경단백질인적검측증명구유특이성조대,경두포초기새분현색반응표명획득료유활력적ESBLs,포함체작위면역항원면역Balb/c소서,3차면역후이용간접ELISA법측정면역효개체도1:106.획득료가고이은정적면역원.
