CAJ | 학술논문

目的:探讨SLC22A18基因转染人胶质瘤U251细胞对放疗敏感性的影响.方法:用脂质体介导的转染技术将pIRES2-EGFP-SLC22A18表达重组质粒导入U251细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)检测SLC22A18基因和蛋白的表达.U251细胞分为4组:对照组、转染组、放疗组和转染联合放疗组.集落形成实验检测各组U251细胞集落形成数,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)和流式细胞仪检测各组U251细胞生长抑制率和凋亡率,进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导的pIRES2-SLC22A18表达重组质粒转染U251细胞对放疗敏感性的影响.结果:重组质粒转染组通过RT-PCR和Western blot证实了SLC22A18基因和蛋白在U251细胞中表达.集落形成实验检测发现SLC22A18基因对U251细胞的集落形成数为(60.6±5.2)个,当放射剂量为3、6和9 Gy时,U251细胞的集落形成数分别为(30.0±3.6)、(13.0±3.0)和(4.0±1.0)个.MTT检测发现SLC22A18基因对U251细胞的生长抑制率为(80.12±5.75)%.当放射剂量为3、6和9 Gy 时,U251细胞的生长抑制率分别为(17.05±4.24)%、(17.34±1.62)%和(18.71±4.59)%.当SLC22A18基因与放疗(3、6和9 Gy)联合作用时,抑制率分别为(81.45±5.32)%、(90.45±1.65)%和(92.62±2.12)%.SLC22A18基因转染所产生的U251细胞凋亡率为17.68%.放疗(3、6和9 Gy)引起的细胞凋亡率分别为4.64%、4.87%和5.42%.当SLC22A18基因与放疗(3、6和9 Gy)联合作用时,凋亡率分别为18.42%、21.48%和23.92%.体内实验结果显示,SLC22A18基因对U251细胞6 Gy照射的抑瘤率比较为1.81.结论:SLC22A18基因转染增加了人胶质瘤U251细胞对放疗的敏感性.
목적:탐토SLC22A18기인전염인효질류U251세포대방료민감성적영향.방법:용지질체개도적전염기술장pIRES2-EGFP-SLC22A18표체중조질립도입U251세포,통과역전록-취합매련반응(RT-PCR)화면역인적(Western blot)검측SLC22A18기인화단백적표체.U251세포분위4조:대조조、전염조、방료조화전염연합방료조.집락형성실험검측각조U251세포집락형성수,용사갑기우담서염미량매반응비색법(MTT법)화류식세포의검측각조U251세포생장억제솔화조망솔,진일보응용라서피하하류모형관찰지질체개도적pIRES2-SLC22A18표체중조질립전염U251세포대방료민감성적영향.결과:중조질립전염조통과RT-PCR화Western blot증실료SLC22A18기인화단백재U251세포중표체.집락형성실험검측발현SLC22A18기인대U251세포적집락형성수위(60.6±5.2)개,당방사제량위3、6화9 Gy시,U251세포적집락형성수분별위(30.0±3.6)、(13.0±3.0)화(4.0±1.0)개.MTT검측발현SLC22A18기인대U251세포적생장억제솔위(80.12±5.75)%.당방사제량위3、6화9 Gy 시,U251세포적생장억제솔분별위(17.05±4.24)%、(17.34±1.62)%화(18.71±4.59)%.당SLC22A18기인여방료(3、6화9 Gy)연합작용시,억제솔분별위(81.45±5.32)%、(90.45±1.65)%화(92.62±2.12)%.SLC22A18기인전염소산생적U251세포조망솔위17.68%.방료(3、6화9 Gy)인기적세포조망솔분별위4.64%、4.87%화5.42%.당SLC22A18기인여방료(3、6화9 Gy)연합작용시,조망솔분별위18.42%、21.48%화23.92%.체내실험결과현시,SLC22A18기인대U251세포6 Gy조사적억류솔비교위1.81.결론:SLC22A18기인전염증가료인효질류U251세포대방료적민감성.