CAJ | 학술논문

目的代谢组学(metabonomics)是生物学研究的新的平台,它可以通过发现生物标本中代谢物质谱的变化进而从机体整体或特定器官代谢状态的角度去评估营养干预措施的作用.丙氨酰谷氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)是临床上常用的人工合成的含谷氨酰胺(glutamine,Gln)的二肽,在创伤修复过程中发挥重要的作用.文中利用代谢组学的方法观察肠内给予Ala-Gln对Sprague-Dawley (SD)大鼠肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)模型门静脉血代谢谱的影响,并同时探讨其与小肠组织学和局部炎症反应的关系.方法 32只SD大鼠分为假手术(sham operation,S)组(n=8),IIRI组(n=8),Ala-Gln组(n=8)和丙氨酸(alanine,Ala)组(n=8).除S组外的其余大鼠均通过结扎肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)给予60min的缺血过程.Ala-Gln 组和Ala组从缺血前3d至再灌注72h后(肠缺血当天除外)分别通过灌胃给予Ala-Gln(0.6g·kg-1·d-1)或Ala(0.6g·kg-1·d-1),再灌注72h后取门静脉血上气相色谱质谱联机(gas chromatography coupled with mass spectrometry,GC/MS)进行代谢物质的分离和识别.代谢组数据通过SIMCA-P+12.0软件进行偏最小二乘法(partial least squares,PLS)分析,得出得分图、载荷图及各种物质的变量重要性因子(variable importance in the projection,VIP)值.同时进行小肠病理学检查及门静脉血肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(Interleukins,IL)-1、6、10浓度检测.结果 PLS分析的得分图能够较明显地区别各组标本.根据VIP值和载荷图,研究发现3种有意义的差异物质分别是葡萄糖(VIP值3.36008)、尿素(VIP值2.81043)和胆固醇(VIP值1.00429).Ala-Gln能明显缓解IIRI后门静脉血葡萄糖(P＜0.01)丰度的降低以及尿素(P＜0.01)和胆固醇(P＜0.01)丰度的升高.Ala-Gln能部分改善IIRI所致的小肠组织学改变并缓解肠门静脉血TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10的变化.而Ala对该IIRI模型并未表现出保护作用.结论肠内给予Ala-Gln有利于维持IIRI后大鼠肠道组织的代谢稳定,该作用与Ala-Gln对肠黏膜完整性的保护和对肠道炎症反应的抑制有关. 目的代謝組學(metabonomics)是生物學研究的新的平檯,它可以通過髮現生物標本中代謝物質譜的變化進而從機體整體或特定器官代謝狀態的角度去評估營養榦預措施的作用.丙氨酰穀氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)是臨床上常用的人工閤成的含穀氨酰胺(glutamine,Gln)的二肽,在創傷脩複過程中髮揮重要的作用.文中利用代謝組學的方法觀察腸內給予Ala-Gln對Sprague-Dawley (SD)大鼠腸缺血再灌註損傷(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)模型門靜脈血代謝譜的影響,併同時探討其與小腸組織學和跼部炎癥反應的關繫.方法 32隻SD大鼠分為假手術(sham operation,S)組(n=8),IIRI組(n=8),Ala-Gln組(n=8)和丙氨痠(alanine,Ala)組(n=8).除S組外的其餘大鼠均通過結扎腸繫膜上動脈(superior mesenteric artery,SMA)給予60min的缺血過程.Ala-Gln 組和Ala組從缺血前3d至再灌註72h後(腸缺血噹天除外)分彆通過灌胃給予Ala-Gln(0.6g·kg-1·d-1)或Ala(0.6g·kg-1·d-1),再灌註72h後取門靜脈血上氣相色譜質譜聯機(gas chromatography coupled with mass spectrometry,GC/MS)進行代謝物質的分離和識彆.代謝組數據通過SIMCA-P+12.0軟件進行偏最小二乘法(partial least squares,PLS)分析,得齣得分圖、載荷圖及各種物質的變量重要性因子(variable importance in the projection,VIP)值.同時進行小腸病理學檢查及門靜脈血腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(Interleukins,IL)-1、6、10濃度檢測.結果 PLS分析的得分圖能夠較明顯地區彆各組標本.根據VIP值和載荷圖,研究髮現3種有意義的差異物質分彆是葡萄糖(VIP值3.36008)、尿素(VIP值2.81043)和膽固醇(VIP值1.00429).Ala-Gln能明顯緩解IIRI後門靜脈血葡萄糖(P＜0.01)豐度的降低以及尿素(P＜0.01)和膽固醇(P＜0.01)豐度的升高.Ala-Gln能部分改善IIRI所緻的小腸組織學改變併緩解腸門靜脈血TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10的變化.而Ala對該IIRI模型併未錶現齣保護作用.結論腸內給予Ala-Gln有利于維持IIRI後大鼠腸道組織的代謝穩定,該作用與Ala-Gln對腸黏膜完整性的保護和對腸道炎癥反應的抑製有關.
목적 대사조학(metabonomics)시생물학연구적신적평태,타가이통과발현생물표본중대사물질보적변화진이종궤체정체혹특정기관대사상태적각도거평고영양간예조시적작용.병안선곡안선알(alanyl-glutamine,Ala-Gln)시림상상상용적인공합성적함곡안선알(glutamine,Gln)적이태,재창상수복과정중발휘중요적작용.문중이용대사조학적방법 관찰장내급여Ala-Gln대Sprague-Dawley (SD)대서장결혈재관주손상(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)모형문정맥혈대사보적영향,병동시탐토기여소장조직학화국부염증반응적관계.방법 32지SD대서분위가수술(sham operation,S)조(n=8),IIRI조(n=8),Ala-Gln조(n=8)화병안산(alanine,Ala)조(n=8).제S조외적기여대서균통과결찰장계막상동맥(superior mesenteric artery,SMA)급여60min적결혈과정.Ala-Gln 조화Ala조종결혈전3d지재관주72h후(장결혈당천제외)분별통과관위급여Ala-Gln(0.6g·kg-1·d-1)혹Ala(0.6g·kg-1·d-1),재관주72h후취문정맥혈상기상색보질보련궤(gas chromatography coupled with mass spectrometry,GC/MS)진행대사물질적분리화식별.대사조수거통과SIMCA-P+12.0연건진행편최소이승법(partial least squares,PLS)분석,득출득분도、재하도급각충물질적변량중요성인자(variable importance in the projection,VIP)치.동시진행소장병이학검사급문정맥혈종류배사인자(tumor necrosis factor,TNF)-α화백개소(Interleukins,IL)-1、6、10농도검측.결과 PLS분석적득분도능구교명현지구별각조표본.근거VIP치화재하도,연구발현3충유의의적차이물질분별시포도당(VIP치3.36008)、뇨소(VIP치2.81043)화담고순(VIP치1.00429).Ala-Gln능명현완해IIRI후문정맥혈포도당(P＜0.01)봉도적강저이급뇨소(P＜0.01)화담고순(P＜0.01)봉도적승고.Ala-Gln능부분개선IIRI소치적소장조직학개변병완해장문정맥혈TNF-α、IL-1、IL-6화IL-10적변화.이Ala대해IIRI모형병미표현출보호작용.결론 장내급여Ala-Gln유리우유지IIRI후대서장도조직적대사은정,해작용여Ala-Gln대장점막완정성적보호화대장도염증반응적억제유관.