福州大学学报（自然科学版）
福州大學學報（自然科學版）
복주대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUZHOU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
2期
254-258
,共5页
邓文汉%卢菀华%傅蓉%陈菁%饶平凡%刘树滔
鄧文漢%盧菀華%傅蓉%陳菁%饒平凡%劉樹滔
산문한%로완화%부용%진정%요평범%류수도
小鼠酪氨酸酶%表达载体%基因克隆%基因表达%大肠杆菌
小鼠酪氨痠酶%錶達載體%基因剋隆%基因錶達%大腸桿菌
소서락안산매%표체재체%기인극륭%기인표체%대장간균
采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从小鼠黑色素瘤总RNA中扩增得到小鼠酪氨酸酶的cDNA.该基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pET-TYR并转化大肠杆菌Rosetta(DE3).SDS-PAGE及蛋白质序列测定表明,经0.8mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPrG)诱导后,可高效表达重组的小鼠酪氨酸酶,表达量约占菌体总蛋白质的25%,表达产物为包涵体.
採用逆轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)方法,從小鼠黑色素瘤總RNA中擴增得到小鼠酪氨痠酶的cDNA.該基因重組到T7啟動子控製下的錶達載體pET-22b(+)中,構建錶達質粒pET-TYR併轉化大腸桿菌Rosetta(DE3).SDS-PAGE及蛋白質序列測定錶明,經0.8mmol/L異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPrG)誘導後,可高效錶達重組的小鼠酪氨痠酶,錶達量約佔菌體總蛋白質的25%,錶達產物為包涵體.
채용역전록-취합매련식반응(RT-PCR)방법,종소서흑색소류총RNA중확증득도소서락안산매적cDNA.해기인중조도T7계동자공제하적표체재체pET-22b(+)중,구건표체질립pET-TYR병전화대장간균Rosetta(DE3).SDS-PAGE급단백질서렬측정표명,경0.8mmol/L이병기류대-β-D-반유당감(IPrG)유도후,가고효표체중조적소서락안산매,표체량약점균체총단백질적25%,표체산물위포함체.
