辐射研究与辐射工艺学报
輻射研究與輻射工藝學報
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JOURNAL OF RADIATION RESEARCH AND RADIATION PROCESSING
2006年
2期
115-119
,共5页
冯爽%曹建平%朱巍%宋建元%李翀%盛方军%樊赛军%F.Eckardt-Schupp
馮爽%曹建平%硃巍%宋建元%李翀%盛方軍%樊賽軍%F.Eckardt-Schupp
풍상%조건평%주외%송건원%리충%성방군%번새군%F.Eckardt-Schupp
毛细血管扩张性共济失调突变基因%乳癌基因1%DNA修复相关蛋白%磷酸化
毛細血管擴張性共濟失調突變基因%乳癌基因1%DNA脩複相關蛋白%燐痠化
모세혈관확장성공제실조돌변기인%유암기인1%DNA수복상관단백%린산화
为阐明毛细血管扩张性共济失调突变基因(Ataxia telangiectasia mutated,ATM)介导的乳癌基因1(Breast cancer gene 1,Brca1)磷酸化及其下游DNA修复相关蛋白(DNA damage repair protein 51,RAD51)在DNA损伤修复信号传导通路中作用机理,以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM细胞(Originated from human skinfibroblast GM Cell,GM0639)为对照,用免疫共沉淀与Western blot方法,观察60Co γ射线照射后共济失调症(Ataxia telangiectasia,AT)细胞、ATM转染的AT细胞(ATM+-AT)和GM细胞的BRCA1及RAD51蛋白表达的变化.经0、5、10、20Gy辐照后,AT细胞通过免疫共沉淀及Western Blot法分析其中ATM和BRCA1蛋白以及BRCA1和RAD51蛋白之间的相互作用以及PI3K抑制剂对ATM磷酸化其下游基因的影响.0Gy照射ATM+-AT和GM细胞未出现BRCA1表达条带;照射后,GM细胞、ATM细胞BRCA1和RAD51蛋白均有表达,而AT细胞无表达;PI3K抑制剂Wortmannin对经电离辐射照射后的AT、ATM+-AT和GM细胞中BRCA1蛋白表达具有抑制作用;照射后ATM+-AT和GM细胞中BRCA1和RAD51蛋白均有表达.因此,电离辐射照射后,BRCA1由ATM介导磷酸化后可进一步与RAD51相互作用,这是信号通路传导过程中的一个级联反映,从而修复损伤的DNA,保持基因组的稳定性.
為闡明毛細血管擴張性共濟失調突變基因(Ataxia telangiectasia mutated,ATM)介導的乳癌基因1(Breast cancer gene 1,Brca1)燐痠化及其下遊DNA脩複相關蛋白(DNA damage repair protein 51,RAD51)在DNA損傷脩複信號傳導通路中作用機理,以源于正常人皮膚的成纖維細胞繫GM細胞(Originated from human skinfibroblast GM Cell,GM0639)為對照,用免疫共沉澱與Western blot方法,觀察60Co γ射線照射後共濟失調癥(Ataxia telangiectasia,AT)細胞、ATM轉染的AT細胞(ATM+-AT)和GM細胞的BRCA1及RAD51蛋白錶達的變化.經0、5、10、20Gy輻照後,AT細胞通過免疫共沉澱及Western Blot法分析其中ATM和BRCA1蛋白以及BRCA1和RAD51蛋白之間的相互作用以及PI3K抑製劑對ATM燐痠化其下遊基因的影響.0Gy照射ATM+-AT和GM細胞未齣現BRCA1錶達條帶;照射後,GM細胞、ATM細胞BRCA1和RAD51蛋白均有錶達,而AT細胞無錶達;PI3K抑製劑Wortmannin對經電離輻射照射後的AT、ATM+-AT和GM細胞中BRCA1蛋白錶達具有抑製作用;照射後ATM+-AT和GM細胞中BRCA1和RAD51蛋白均有錶達.因此,電離輻射照射後,BRCA1由ATM介導燐痠化後可進一步與RAD51相互作用,這是信號通路傳導過程中的一箇級聯反映,從而脩複損傷的DNA,保持基因組的穩定性.
위천명모세혈관확장성공제실조돌변기인(Ataxia telangiectasia mutated,ATM)개도적유암기인1(Breast cancer gene 1,Brca1)린산화급기하유DNA수복상관단백(DNA damage repair protein 51,RAD51)재DNA손상수복신호전도통로중작용궤리,이원우정상인피부적성섬유세포계GM세포(Originated from human skinfibroblast GM Cell,GM0639)위대조,용면역공침정여Western blot방법,관찰60Co γ사선조사후공제실조증(Ataxia telangiectasia,AT)세포、ATM전염적AT세포(ATM+-AT)화GM세포적BRCA1급RAD51단백표체적변화.경0、5、10、20Gy복조후,AT세포통과면역공침정급Western Blot법분석기중ATM화BRCA1단백이급BRCA1화RAD51단백지간적상호작용이급PI3K억제제대ATM린산화기하유기인적영향.0Gy조사ATM+-AT화GM세포미출현BRCA1표체조대;조사후,GM세포、ATM세포BRCA1화RAD51단백균유표체,이AT세포무표체;PI3K억제제Wortmannin대경전리복사조사후적AT、ATM+-AT화GM세포중BRCA1단백표체구유억제작용;조사후ATM+-AT화GM세포중BRCA1화RAD51단백균유표체.인차,전리복사조사후,BRCA1유ATM개도린산화후가진일보여RAD51상호작용,저시신호통로전도과정중적일개급련반영,종이수복손상적DNA,보지기인조적은정성.