生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2007年
4期
355-360
,共6页
李涛%刘国珍%谭德明%吴传湘%刘洪波
李濤%劉國珍%譚德明%吳傳湘%劉洪波
리도%류국진%담덕명%오전상%류홍파
HBV X蛋白%真核表达%乙型肝炎病毒%细胞模型
HBV X蛋白%真覈錶達%乙型肝炎病毒%細胞模型
HBV X단백%진핵표체%을형간염병독%세포모형
采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HBV X基因,定向亚克隆入真核表达载体pRc/CMV2,构建重组质粒pCMV/X;采用脂质体法转染QSG7701细胞,筛选阳性细胞克隆;RT-PCR法检测HBV X mRNA的表达情况,Western blotting法鉴定HBx蛋白的表达.结果表明,构建的真核重组表达质粒pCMV/X中包含有完整的HBV X基因片断,pCMV/X转染的QSG7701细胞中有HBV X mRNA及HBx蛋白的稳定表达.成功建立了HBV X稳定转染的细胞系,为进一步探讨HBx在HCC的发生发展过程中所起的作用,提供了一个有价值的细胞模型.
採用聚閤酶鏈反應(PCR)方法擴增HBV X基因,定嚮亞剋隆入真覈錶達載體pRc/CMV2,構建重組質粒pCMV/X;採用脂質體法轉染QSG7701細胞,篩選暘性細胞剋隆;RT-PCR法檢測HBV X mRNA的錶達情況,Western blotting法鑒定HBx蛋白的錶達.結果錶明,構建的真覈重組錶達質粒pCMV/X中包含有完整的HBV X基因片斷,pCMV/X轉染的QSG7701細胞中有HBV X mRNA及HBx蛋白的穩定錶達.成功建立瞭HBV X穩定轉染的細胞繫,為進一步探討HBx在HCC的髮生髮展過程中所起的作用,提供瞭一箇有價值的細胞模型.
채용취합매련반응(PCR)방법확증HBV X기인,정향아극륭입진핵표체재체pRc/CMV2,구건중조질립pCMV/X;채용지질체법전염QSG7701세포,사선양성세포극륭;RT-PCR법검측HBV X mRNA적표체정황,Western blotting법감정HBx단백적표체.결과표명,구건적진핵중조표체질립pCMV/X중포함유완정적HBV X기인편단,pCMV/X전염적QSG7701세포중유HBV X mRNA급HBx단백적은정표체.성공건립료HBV X은정전염적세포계,위진일보탐토HBx재HCC적발생발전과정중소기적작용,제공료일개유개치적세포모형.
