第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
7期
631-633
,共3页
张王峰%徐海峰%周润锁%袁梦晖%周飞华%孙涛%赵华栋
張王峰%徐海峰%週潤鎖%袁夢暉%週飛華%孫濤%趙華棟
장왕봉%서해봉%주윤쇄%원몽휘%주비화%손도%조화동
ECV304细胞%血管抑素%受体%内化
ECV304細胞%血管抑素%受體%內化
ECV304세포%혈관억소%수체%내화
目的 探讨温度、时间及125碘-血管抑素(125I-angiostatin,125I-AS)浓度等因素对人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞血管抑素(angiostafin,AS)受体内化的影响.方法 利用弹性蛋白酶有限水解法制备AS,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,Ch-T法进行125I标记,纸层析法测标记率,Sephadex-G50柱纯化,将纯化产物分别加入牛血清白蛋白(BSA)、生理盐水及不同物质的量比的半胱氨酸,以观察其体外稳定性.利用放射性配基结合分析法,以125I-As为放射性配基,于4、24、37℃条件下,固定浓度125I.As与ECV304细胞共同保温不同时间后,分别检测细胞的受体内化率;37℃条件下,不同浓度125I-As与ECV304细胞共同保温不同时间后,分别检测细胞的受体内化率.结果 蛋白水解产物凝胶电泳相对分子质量为38×103,标记率可达85%,标记产物在体外较稳定.4℃时,受体内化率较低,24℃时,受体内化率有所增加,37℃时,受体内化率较高;37℃时,随125I-As浓度增大,受体内化率降低(P＜0.01);不同温度、浓度时,受体内化率均随时间延长而增加(P＜0.01,P＜0.05).结论 ECV304细胞AS受体内化受温度、时间及125I-AS浓度等因素影响,呈温度-效应、时间-效应关系,与125I-AS浓度呈负相关.
目的 探討溫度、時間及125碘-血管抑素(125I-angiostatin,125I-AS)濃度等因素對人臍靜脈內皮細胞繫ECV304細胞血管抑素(angiostafin,AS)受體內化的影響.方法 利用彈性蛋白酶有限水解法製備AS,SDS-PAGE凝膠電泳鑒定,Ch-T法進行125I標記,紙層析法測標記率,Sephadex-G50柱純化,將純化產物分彆加入牛血清白蛋白(BSA)、生理鹽水及不同物質的量比的半胱氨痠,以觀察其體外穩定性.利用放射性配基結閤分析法,以125I-As為放射性配基,于4、24、37℃條件下,固定濃度125I.As與ECV304細胞共同保溫不同時間後,分彆檢測細胞的受體內化率;37℃條件下,不同濃度125I-As與ECV304細胞共同保溫不同時間後,分彆檢測細胞的受體內化率.結果 蛋白水解產物凝膠電泳相對分子質量為38×103,標記率可達85%,標記產物在體外較穩定.4℃時,受體內化率較低,24℃時,受體內化率有所增加,37℃時,受體內化率較高;37℃時,隨125I-As濃度增大,受體內化率降低(P＜0.01);不同溫度、濃度時,受體內化率均隨時間延長而增加(P＜0.01,P＜0.05).結論 ECV304細胞AS受體內化受溫度、時間及125I-AS濃度等因素影響,呈溫度-效應、時間-效應關繫,與125I-AS濃度呈負相關.
목적 탐토온도、시간급125전-혈관억소(125I-angiostatin,125I-AS)농도등인소대인제정맥내피세포계ECV304세포혈관억소(angiostafin,AS)수체내화적영향.방법 이용탄성단백매유한수해법제비AS,SDS-PAGE응효전영감정,Ch-T법진행125I표기,지층석법측표기솔,Sephadex-G50주순화,장순화산물분별가입우혈청백단백(BSA)、생리염수급불동물질적량비적반광안산,이관찰기체외은정성.이용방사성배기결합분석법,이125I-As위방사성배기,우4、24、37℃조건하,고정농도125I.As여ECV304세포공동보온불동시간후,분별검측세포적수체내화솔;37℃조건하,불동농도125I-As여ECV304세포공동보온불동시간후,분별검측세포적수체내화솔.결과 단백수해산물응효전영상대분자질량위38×103,표기솔가체85%,표기산물재체외교은정.4℃시,수체내화솔교저,24℃시,수체내화솔유소증가,37℃시,수체내화솔교고;37℃시,수125I-As농도증대,수체내화솔강저(P＜0.01);불동온도、농도시,수체내화솔균수시간연장이증가(P＜0.01,P＜0.05).결론 ECV304세포AS수체내화수온도、시간급125I-AS농도등인소영향,정온도-효응、시간-효응관계,여125I-AS농도정부상관.
