细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
6期
501-503,506
,共4页
明志君%吴海竞%张光波%胡玉敏%邱玉华%张学光
明誌君%吳海競%張光波%鬍玉敏%邱玉華%張學光
명지군%오해경%장광파%호옥민%구옥화%장학광
PD-1%杂交瘤%单克隆抗体
PD-1%雜交瘤%單剋隆抗體
PD-1%잡교류%단극륭항체
目的: 制备鼠抗人PD-1单克隆抗体(mAb)及鉴定其生物学特性.方法: 以基因转染细胞PD-1/L929为免疫原, 免疫BALB/c小鼠;采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合, 经选择性克隆化培养及流式细胞术(FCM)分析, 筛选分泌鼠抗人PD-1分子mAb的杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、 Western blot、竞争结合抑制试验及肿瘤细胞株测定等方法对mAb进行生物学特性鉴定.结果: 获得了2株持续稳定分泌鼠抗人PD-1mAb的杂交瘤细胞株, 命名为1F2和5F10.对其生物学特性的鉴定结果表明, 均为条带相对分子质量在(Mr)55 000左右的免疫球蛋白, 具有不同的PD-1结合位点;1F2 mAb可识别SKHep-1和7721细胞株表面的PD-1分子, 而5F10可识别Raji细胞株的PD-1分子.结论: 成功获得了2株鼠抗人PD-1杂交瘤及其分泌的mAb.
目的: 製備鼠抗人PD-1單剋隆抗體(mAb)及鑒定其生物學特性.方法: 以基因轉染細胞PD-1/L929為免疫原, 免疫BALB/c小鼠;採用淋巴細胞雜交瘤技術進行細胞融閤, 經選擇性剋隆化培養及流式細胞術(FCM)分析, 篩選分泌鼠抗人PD-1分子mAb的雜交瘤細胞株;採用Ig亞型快速定性試紙法、染色體覈型分析、 Western blot、競爭結閤抑製試驗及腫瘤細胞株測定等方法對mAb進行生物學特性鑒定.結果: 穫得瞭2株持續穩定分泌鼠抗人PD-1mAb的雜交瘤細胞株, 命名為1F2和5F10.對其生物學特性的鑒定結果錶明, 均為條帶相對分子質量在(Mr)55 000左右的免疫毬蛋白, 具有不同的PD-1結閤位點;1F2 mAb可識彆SKHep-1和7721細胞株錶麵的PD-1分子, 而5F10可識彆Raji細胞株的PD-1分子.結論: 成功穫得瞭2株鼠抗人PD-1雜交瘤及其分泌的mAb.
목적: 제비서항인PD-1단극륭항체(mAb)급감정기생물학특성.방법: 이기인전염세포PD-1/L929위면역원, 면역BALB/c소서;채용림파세포잡교류기술진행세포융합, 경선택성극륭화배양급류식세포술(FCM)분석, 사선분비서항인PD-1분자mAb적잡교류세포주;채용Ig아형쾌속정성시지법、염색체핵형분석、 Western blot、경쟁결합억제시험급종류세포주측정등방법대mAb진행생물학특성감정.결과: 획득료2주지속은정분비서항인PD-1mAb적잡교류세포주, 명명위1F2화5F10.대기생물학특성적감정결과표명, 균위조대상대분자질량재(Mr)55 000좌우적면역구단백, 구유불동적PD-1결합위점;1F2 mAb가식별SKHep-1화7721세포주표면적PD-1분자, 이5F10가식별Raji세포주적PD-1분자.결론: 성공획득료2주서항인PD-1잡교류급기분비적mAb.
