新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
4期
803-807
,共5页
简子健%马素贞%孙其喆%沈炯玉%苗中秋%吕伟
簡子健%馬素貞%孫其喆%瀋炯玉%苗中鞦%呂偉
간자건%마소정%손기철%침형옥%묘중추%려위
牛双芽巴贝斯虫%HSP20外显子基因%巢式PCR%检测
牛雙芽巴貝斯蟲%HSP20外顯子基因%巢式PCR%檢測
우쌍아파패사충%HSP20외현자기인%소식PCR%검측
[目的与方法]根据Genbank上登陆的双芽巴贝斯虫HSP20基因设计两对引物, SHSP-P1与SHSP-P2和SHSP-P3与 SHSP-P4,以其建立牛双芽巴贝斯虫巢式PCR快速检测方法.[结果]第一次、第二次扩增的退火温度均为57℃,分别扩增出约631和409 bp的条带,与预期的大小相符,而作为对照样本的牛巴贝斯虫、牛环形泰勒虫基因组DNA均无此扩增目的条带出现.将感染双芽巴贝斯虫的全血基因组DNA做10倍递减稀释到106倍扩增时,巢式PCR还能见到目的条带,其灵敏度相当于4.6 pg/mL全血基因组DNA.在对50份疫区牛全血DNA样本检测中,阳性检出率分别为22% (11/50).[结论]所建立的牛双芽巴贝斯虫巢式PCR方法准确、敏感、特异,可以用于牛双芽巴贝斯虫病的快速检测和小范围的流行病学调查,具有重要的临床意义.
[目的與方法]根據Genbank上登陸的雙芽巴貝斯蟲HSP20基因設計兩對引物, SHSP-P1與SHSP-P2和SHSP-P3與 SHSP-P4,以其建立牛雙芽巴貝斯蟲巢式PCR快速檢測方法.[結果]第一次、第二次擴增的退火溫度均為57℃,分彆擴增齣約631和409 bp的條帶,與預期的大小相符,而作為對照樣本的牛巴貝斯蟲、牛環形泰勒蟲基因組DNA均無此擴增目的條帶齣現.將感染雙芽巴貝斯蟲的全血基因組DNA做10倍遞減稀釋到106倍擴增時,巢式PCR還能見到目的條帶,其靈敏度相噹于4.6 pg/mL全血基因組DNA.在對50份疫區牛全血DNA樣本檢測中,暘性檢齣率分彆為22% (11/50).[結論]所建立的牛雙芽巴貝斯蟲巢式PCR方法準確、敏感、特異,可以用于牛雙芽巴貝斯蟲病的快速檢測和小範圍的流行病學調查,具有重要的臨床意義.
[목적여방법]근거Genbank상등륙적쌍아파패사충HSP20기인설계량대인물, SHSP-P1여SHSP-P2화SHSP-P3여 SHSP-P4,이기건립우쌍아파패사충소식PCR쾌속검측방법.[결과]제일차、제이차확증적퇴화온도균위57℃,분별확증출약631화409 bp적조대,여예기적대소상부,이작위대조양본적우파패사충、우배형태륵충기인조DNA균무차확증목적조대출현.장감염쌍아파패사충적전혈기인조DNA주10배체감희석도106배확증시,소식PCR환능견도목적조대,기령민도상당우4.6 pg/mL전혈기인조DNA.재대50빈역구우전혈DNA양본검측중,양성검출솔분별위22% (11/50).[결론]소건립적우쌍아파패사충소식PCR방법준학、민감、특이,가이용우우쌍아파패사충병적쾌속검측화소범위적류행병학조사,구유중요적림상의의.
