中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
45期
8394-8398
,共5页
何亚芳%陈惠金%钱龙华%陈冠仪
何亞芳%陳惠金%錢龍華%陳冠儀
하아방%진혜금%전룡화%진관의
少突胶质细胞前体%小胶质细胞%脂多糖%过氧亚硝酸盐%毒性作用
少突膠質細胞前體%小膠質細胞%脂多糖%過氧亞硝痠鹽%毒性作用
소돌효질세포전체%소효질세포%지다당%과양아초산염%독성작용
背景:已有实验证实,脑白质病变如多发性硬化症和脑室周围白质软化等一些神经病变的发病机制,均涉及到局部小胶质细胞的激活.目的:探讨细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体的毒性作用.方法:取2 d龄SD大鼠脑内小胶质细胞和少突胶质细胞前体共培养,分为共培养对照组和共培养脂多糖组.对共培养细胞经脂多糖100 μg/L 诱导48 h,分别应用硝酸还原比色法检测一氧化氮含量,还原-比色法检测超氧阴离子含量,免疫细胞染色法检测过氧亚硝酸盐含量,Hochest33342/PI荧光染色法观察细胞死亡的形态学改变,以及流式细胞仪检测细胞成活率.结果与结论:与共培养对照组比较,脂多糖诱导导致共培养细胞内一氧化氮、超氧阴离子、过氧亚硝酸盐含量均明显增加,少突胶质细胞前体的凋亡率亦显著增加.通过体外观察,确认脂多糖诱导少突胶质细胞前体的死亡通路,是由于脂多糖诱导小胶质细胞激活,导致小胶质细胞表达一氧化氮合酶和活化NADPH氧化酶,致使其产物一氧化氮和超氧阴离子大量生成,两者进一步反应生成大量的毒性因子过氧亚硝酸盐,作用于少突胶质细胞前体,从而导致少突胶质细胞前体的死亡.
揹景:已有實驗證實,腦白質病變如多髮性硬化癥和腦室週圍白質軟化等一些神經病變的髮病機製,均涉及到跼部小膠質細胞的激活.目的:探討細菌脂多糖誘導活性小膠質細胞對少突膠質細胞前體的毒性作用.方法:取2 d齡SD大鼠腦內小膠質細胞和少突膠質細胞前體共培養,分為共培養對照組和共培養脂多糖組.對共培養細胞經脂多糖100 μg/L 誘導48 h,分彆應用硝痠還原比色法檢測一氧化氮含量,還原-比色法檢測超氧陰離子含量,免疫細胞染色法檢測過氧亞硝痠鹽含量,Hochest33342/PI熒光染色法觀察細胞死亡的形態學改變,以及流式細胞儀檢測細胞成活率.結果與結論:與共培養對照組比較,脂多糖誘導導緻共培養細胞內一氧化氮、超氧陰離子、過氧亞硝痠鹽含量均明顯增加,少突膠質細胞前體的凋亡率亦顯著增加.通過體外觀察,確認脂多糖誘導少突膠質細胞前體的死亡通路,是由于脂多糖誘導小膠質細胞激活,導緻小膠質細胞錶達一氧化氮閤酶和活化NADPH氧化酶,緻使其產物一氧化氮和超氧陰離子大量生成,兩者進一步反應生成大量的毒性因子過氧亞硝痠鹽,作用于少突膠質細胞前體,從而導緻少突膠質細胞前體的死亡.
배경:이유실험증실,뇌백질병변여다발성경화증화뇌실주위백질연화등일사신경병변적발병궤제,균섭급도국부소효질세포적격활.목적:탐토세균지다당유도활성소효질세포대소돌효질세포전체적독성작용.방법:취2 d령SD대서뇌내소효질세포화소돌효질세포전체공배양,분위공배양대조조화공배양지다당조.대공배양세포경지다당100 μg/L 유도48 h,분별응용초산환원비색법검측일양화담함량,환원-비색법검측초양음리자함량,면역세포염색법검측과양아초산염함량,Hochest33342/PI형광염색법관찰세포사망적형태학개변,이급류식세포의검측세포성활솔.결과여결론:여공배양대조조비교,지다당유도도치공배양세포내일양화담、초양음리자、과양아초산염함량균명현증가,소돌효질세포전체적조망솔역현저증가.통과체외관찰,학인지다당유도소돌효질세포전체적사망통로,시유우지다당유도소효질세포격활,도치소효질세포표체일양화담합매화활화NADPH양화매,치사기산물일양화담화초양음리자대량생성,량자진일보반응생성대량적독성인자과양아초산염,작용우소돌효질세포전체,종이도치소돌효질세포전체적사망.