解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
4期
484-488
,共5页
王海萍%吕洋%张雷%王浩宇%陈炜%邵素霞
王海萍%呂洋%張雷%王浩宇%陳煒%邵素霞
왕해평%려양%장뢰%왕호우%진위%소소하
骨髓间充质干细胞%催产素%心肌细胞%细胞分化%免疫组织化学%大鼠
骨髓間充質榦細胞%催產素%心肌細胞%細胞分化%免疫組織化學%大鼠
골수간충질간세포%최산소%심기세포%세포분화%면역조직화학%대서
目的 应用催产素(OT)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化,探索BMSCs向心肌细胞分化的诱导方法.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养BMSCs,应用OT定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、心肌特异性肌钙蛋白T(C-TnT)的表达,应用透射电镜对分化细胞进行鉴定.结果 给予OT诱导后,BMCs形态和排列方式变化明显,可见诱导1周的细胞体积增大并延伸,多数细胞呈长梭形,平行排列生长.诱导4周的细胞密集呈片状生长,多数细胞呈杆状,并与邻近细胞相连形成类肌管结构.BMSCs体外经OT诱导后分化的细胞结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、C-TnT均表达阳性,其中α-横纹肌肌动蛋白和结蛋白的阳性率较高,分别为58.06 % 和33.24 %,C-TnT阳性率较低为28.32 %.激光扫描共焦扫描显微镜观察到分化细胞的胞质内α-横纹肌肌动蛋白和肌钙蛋白T均有阳性表达,分别呈现红色和绿色,当两者同时被观察时可见其共表达的部位呈黄色.透射电镜观察:分化细胞的胞质内可见到平行排列的肌丝,富含线粒体、糖原和核糖体.结论 OT可以诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞.
目的 應用催產素(OT)體外誘導骨髓間充質榦細胞(BMSCs)嚮心肌樣細胞分化,探索BMSCs嚮心肌細胞分化的誘導方法.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分離培養BMSCs,應用OT定嚮誘導,相差顯微鏡觀察細胞形態學變化,應用免疫細胞化學、激光掃描共焦顯微鏡技術檢測結蛋白、α-橫紋肌肌動蛋白、心肌特異性肌鈣蛋白T(C-TnT)的錶達,應用透射電鏡對分化細胞進行鑒定.結果 給予OT誘導後,BMCs形態和排列方式變化明顯,可見誘導1週的細胞體積增大併延伸,多數細胞呈長梭形,平行排列生長.誘導4週的細胞密集呈片狀生長,多數細胞呈桿狀,併與鄰近細胞相連形成類肌管結構.BMSCs體外經OT誘導後分化的細胞結蛋白、α-橫紋肌肌動蛋白、C-TnT均錶達暘性,其中α-橫紋肌肌動蛋白和結蛋白的暘性率較高,分彆為58.06 % 和33.24 %,C-TnT暘性率較低為28.32 %.激光掃描共焦掃描顯微鏡觀察到分化細胞的胞質內α-橫紋肌肌動蛋白和肌鈣蛋白T均有暘性錶達,分彆呈現紅色和綠色,噹兩者同時被觀察時可見其共錶達的部位呈黃色.透射電鏡觀察:分化細胞的胞質內可見到平行排列的肌絲,富含線粒體、糖原和覈糖體.結論 OT可以誘導骨髓間充質榦細胞定嚮分化為心肌樣細胞.
목적 응용최산소(OT)체외유도골수간충질간세포(BMSCs)향심기양세포분화,탐색BMSCs향심기세포분화적유도방법.방법 취SD대서사지골골수,분리배양BMSCs,응용OT정향유도,상차현미경관찰세포형태학변화,응용면역세포화학、격광소묘공초현미경기술검측결단백、α-횡문기기동단백、심기특이성기개단백T(C-TnT)적표체,응용투사전경대분화세포진행감정.결과 급여OT유도후,BMCs형태화배렬방식변화명현,가견유도1주적세포체적증대병연신,다수세포정장사형,평행배렬생장.유도4주적세포밀집정편상생장,다수세포정간상,병여린근세포상련형성류기관결구.BMSCs체외경OT유도후분화적세포결단백、α-횡문기기동단백、C-TnT균표체양성,기중α-횡문기기동단백화결단백적양성솔교고,분별위58.06 % 화33.24 %,C-TnT양성솔교저위28.32 %.격광소묘공초소묘현미경관찰도분화세포적포질내α-횡문기기동단백화기개단백T균유양성표체,분별정현홍색화록색,당량자동시피관찰시가견기공표체적부위정황색.투사전경관찰:분화세포적포질내가견도평행배렬적기사,부함선립체、당원화핵당체.결론 OT가이유도골수간충질간세포정향분화위심기양세포.
