中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2011年
6期
532-537
,共6页
韦碧柳%李国平%蒲泽锦%黄官友%冯家琳%叶艳清%吴灵飞
韋碧柳%李國平%蒲澤錦%黃官友%馮傢琳%葉豔清%吳靈飛
위벽류%리국평%포택금%황관우%풍가림%협염청%오령비
腺苷%细胞凋亡%内质网%应激%EC109细胞
腺苷%細胞凋亡%內質網%應激%EC109細胞
선감%세포조망%내질망%응격%EC109세포
目的 探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用.方法 腺苷2 mmol·L-1作用于EC109细胞24 ～72 h或腺苷0.5 ～4 mmol·L-1作用于EC109细胞36 h,MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系；免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白78( GRP78),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3,转录因子CHOP和核因子κB (NF-κB)的表达及亚细胞定位；原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡；Western蛋白印迹法检测内质网应激相关蛋白表达.结果 腺苷对EC109细胞生长具有明显的抑制作用.腺苷2 mmol·L-1与EC109细胞作用24,36,48和72 h,细胞存活率分别为(57.7±15.0)％,(56.5±11.1)％,(43.8±5.7)％和(28.8±4.1)％,呈时间依赖性下降(r=0.9192,P＜0.01)；腺苷0.5,1,2和4 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(83.1±1 1.2)％,(67.9±6.7)％,(55.3±5.0)％和(45.4±5.4)％,呈浓度依赖性降低(r=0.8252,P＜0.01).腺苷0.5 ～4mmol·L-1与EC109细胞作用36 h,细胞凋亡率分别为(15.5±1.1)％,(28.2±0.8)％,(40.1±2.2)％和(50.6±1.3)％,与对照组(2.1±0.3)％相比均明显增加(P＜0.05).腺苷2 mmol· L-1与EC109细胞作用36 h,与正常对照组相比,GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3和CHOP表达明显增强(P ＜0.05,P＜0.01),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3和CHOP发生核易位.GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3、CHOP和NF-κB表达呈浓度依赖性增加(rGRP78=0.9471,(r)胱天蛋白酶4=0.8977,(r)胱天蛋白酶3=0.968,(r)CHOP=0.9762,(r)NF-κB=0.9471,P＜0.05).结论 腺苷可诱导人食管癌EC109细胞凋亡,其分子机制可能与内质网应激凋亡途径的启动有关.
目的 探討內質網應激途徑在腺苷誘導食管癌EC109細胞凋亡中的作用.方法 腺苷2 mmol·L-1作用于EC109細胞24 ～72 h或腺苷0.5 ～4 mmol·L-1作用于EC109細胞36 h,MTT法觀察腺苷對EC109細胞存活率的時效和量效關繫；免疫熒光法檢測葡萄糖調節蛋白78( GRP78),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3,轉錄因子CHOP和覈因子κB (NF-κB)的錶達及亞細胞定位；原位末耑轉移酶標記技術檢測細胞凋亡；Western蛋白印跡法檢測內質網應激相關蛋白錶達.結果 腺苷對EC109細胞生長具有明顯的抑製作用.腺苷2 mmol·L-1與EC109細胞作用24,36,48和72 h,細胞存活率分彆為(57.7±15.0)％,(56.5±11.1)％,(43.8±5.7)％和(28.8±4.1)％,呈時間依賴性下降(r=0.9192,P＜0.01)；腺苷0.5,1,2和4 mmol· L-1與EC109細胞作用36 h,隨藥物濃度增加,細胞存活率依次為(83.1±1 1.2)％,(67.9±6.7)％,(55.3±5.0)％和(45.4±5.4)％,呈濃度依賴性降低(r=0.8252,P＜0.01).腺苷0.5 ～4mmol·L-1與EC109細胞作用36 h,細胞凋亡率分彆為(15.5±1.1)％,(28.2±0.8)％,(40.1±2.2)％和(50.6±1.3)％,與對照組(2.1±0.3)％相比均明顯增加(P＜0.05).腺苷2 mmol· L-1與EC109細胞作用36 h,與正常對照組相比,GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3和CHOP錶達明顯增彊(P ＜0.05,P＜0.01),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3和CHOP髮生覈易位.GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3、CHOP和NF-κB錶達呈濃度依賴性增加(rGRP78=0.9471,(r)胱天蛋白酶4=0.8977,(r)胱天蛋白酶3=0.968,(r)CHOP=0.9762,(r)NF-κB=0.9471,P＜0.05).結論 腺苷可誘導人食管癌EC109細胞凋亡,其分子機製可能與內質網應激凋亡途徑的啟動有關.
목적 탐토내질망응격도경재선감유도식관암EC109세포조망중적작용.방법 선감2 mmol·L-1작용우EC109세포24 ～72 h혹선감0.5 ～4 mmol·L-1작용우EC109세포36 h,MTT법관찰선감대EC109세포존활솔적시효화량효관계；면역형광법검측포도당조절단백78( GRP78),광천단백매4,광천단백매3,전록인자CHOP화핵인자κB (NF-κB)적표체급아세포정위；원위말단전이매표기기술검측세포조망；Western단백인적법검측내질망응격상관단백표체.결과 선감대EC109세포생장구유명현적억제작용.선감2 mmol·L-1여EC109세포작용24,36,48화72 h,세포존활솔분별위(57.7±15.0)％,(56.5±11.1)％,(43.8±5.7)％화(28.8±4.1)％,정시간의뢰성하강(r=0.9192,P＜0.01)；선감0.5,1,2화4 mmol· L-1여EC109세포작용36 h,수약물농도증가,세포존활솔의차위(83.1±1 1.2)％,(67.9±6.7)％,(55.3±5.0)％화(45.4±5.4)％,정농도의뢰성강저(r=0.8252,P＜0.01).선감0.5 ～4mmol·L-1여EC109세포작용36 h,세포조망솔분별위(15.5±1.1)％,(28.2±0.8)％,(40.1±2.2)％화(50.6±1.3)％,여대조조(2.1±0.3)％상비균명현증가(P＜0.05).선감2 mmol· L-1여EC109세포작용36 h,여정상대조조상비,GRP78、광천단백매4、광천단백매3화CHOP표체명현증강(P ＜0.05,P＜0.01),광천단백매4,광천단백매3화CHOP발생핵역위.GRP78、광천단백매4、광천단백매3、CHOP화NF-κB표체정농도의뢰성증가(rGRP78=0.9471,(r)광천단백매4=0.8977,(r)광천단백매3=0.968,(r)CHOP=0.9762,(r)NF-κB=0.9471,P＜0.05).결론 선감가유도인식관암EC109세포조망,기분자궤제가능여내질망응격조망도경적계동유관.
