CAJ | 학술논문

目的:探讨EDN1基因5'上游AP-1顺式调控元件在同型半胱氨酸(Hcy)诱导HUVECs EDN1基因转录中的作用.方法:用荧光探针DCF检测HUVECs内活性氧的含量;用RT-PCR法检测EDN1mRNA的表达,用Western blotting法测定c-jun/AP-1蛋白的表达;同时用双抗夹心法测定HUVECs上清液中EDN1的分泌;利用重组质粒的瞬时转染技术观察了HUVECs的AP-1报告基因的活性.结果:Hcy能明显增加HUVECs ROS的生成,促进 EDN1的分泌和提高EDN1mRNA的表达;瞬时转染分析实验结果显示Hcy能明显诱导质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)的突变体pGL3-EDN1-AP-1 MU(-115/+135) 荧光素酶的基础表达及Hcy的诱导作用均明显降低.结论:推测Hcy可能改变HUVECs内的氧化还原状态,促进ROS的释放,激活核转录因子AP-1,通过EDN1基因中AP-1顺式作用元件调控该基因转录.
목적:탐토EDN1기인5'상유AP-1순식조공원건재동형반광안산(Hcy)유도HUVECs EDN1기인전록중적작용.방법:용형광탐침DCF검측HUVECs내활성양적함량;용RT-PCR법검측EDN1mRNA적표체,용Western blotting법측정c-jun/AP-1단백적표체;동시용쌍항협심법측정HUVECs상청액중EDN1적분비;이용중조질립적순시전염기술관찰료HUVECs적AP-1보고기인적활성.결과:Hcy능명현증가HUVECs ROS적생성,촉진 EDN1적분비화제고EDN1mRNA적표체;순시전염분석실험결과현시Hcy능명현유도질립pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)형광소매적표체,단대질립pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)적돌변체pGL3-EDN1-AP-1 MU(-115/+135) 형광소매적기출표체급Hcy적유도작용균명현강저.결론:추측Hcy가능개변HUVECs내적양화환원상태,촉진ROS적석방,격활핵전록인자AP-1,통과EDN1기인중AP-1순식작용원건조공해기인전록.