南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
1期
5-8
,共4页
张利佳%李卫星%戈应滨%宋鸣子%杜军%顾洛
張利佳%李衛星%戈應濱%宋鳴子%杜軍%顧洛
장리가%리위성%과응빈%송명자%두군%고락
ATP缺失%肾小管上皮细胞(NRK52E)%肌动蛋白%细胞骨架%ERM蛋白
ATP缺失%腎小管上皮細胞(NRK52E)%肌動蛋白%細胞骨架%ERM蛋白
ATP결실%신소관상피세포(NRK52E)%기동단백%세포골가%ERM단백
目的:探讨ATP缺失时大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)肌动蛋白细胞骨架重组情况及其可能机制.方法:用含0.1 μmol/L antimycin A的ATP缺失缓冲液处理培养的NRK52E细胞,建立细胞的体外ATP缺失模型;采用FITC标记的鬼笔环肽标记纤维型肌动蛋白(F-actin),用流式细胞仪检测技术分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况;用Western blot及免疫印迹技术检测ATP缺失后NRK52E细胞内骨架组分(Triton不溶组分)及上清组分(Triton可溶组分)中ERM(Ezrin/Radixin/Moesin)蛋白的分布改变.结果:体外ATP缺失模型建立,各实验组细胞内ATP浓度呈时间依赖性的下降(P＜0.05);ATP缺失后,NRK52E细胞内纤维型肌动蛋白的量渐增,且肌动蛋白的聚合程度随ATP缺失时间延长而增加(P＜0.05);ATP缺失后,ERM蛋白从细胞骨架解离进入胞浆,且ERM蛋白从细胞骨架的解离程度随ATP缺失的程度的增加而增加(P＜0.05).结论:ATP缺失后NRK52E细胞骨架重组可能与ERM蛋白的重分布相关.
目的:探討ATP缺失時大鼠近耑腎小管上皮細胞(NRK52E細胞)肌動蛋白細胞骨架重組情況及其可能機製.方法:用含0.1 μmol/L antimycin A的ATP缺失緩遲液處理培養的NRK52E細胞,建立細胞的體外ATP缺失模型;採用FITC標記的鬼筆環肽標記纖維型肌動蛋白(F-actin),用流式細胞儀檢測技術分析肌動蛋白細胞骨架的重組情況;用Western blot及免疫印跡技術檢測ATP缺失後NRK52E細胞內骨架組分(Triton不溶組分)及上清組分(Triton可溶組分)中ERM(Ezrin/Radixin/Moesin)蛋白的分佈改變.結果:體外ATP缺失模型建立,各實驗組細胞內ATP濃度呈時間依賴性的下降(P＜0.05);ATP缺失後,NRK52E細胞內纖維型肌動蛋白的量漸增,且肌動蛋白的聚閤程度隨ATP缺失時間延長而增加(P＜0.05);ATP缺失後,ERM蛋白從細胞骨架解離進入胞漿,且ERM蛋白從細胞骨架的解離程度隨ATP缺失的程度的增加而增加(P＜0.05).結論:ATP缺失後NRK52E細胞骨架重組可能與ERM蛋白的重分佈相關.
목적:탐토ATP결실시대서근단신소관상피세포(NRK52E세포)기동단백세포골가중조정황급기가능궤제.방법:용함0.1 μmol/L antimycin A적ATP결실완충액처리배양적NRK52E세포,건립세포적체외ATP결실모형;채용FITC표기적귀필배태표기섬유형기동단백(F-actin),용류식세포의검측기술분석기동단백세포골가적중조정황;용Western blot급면역인적기술검측ATP결실후NRK52E세포내골가조분(Triton불용조분)급상청조분(Triton가용조분)중ERM(Ezrin/Radixin/Moesin)단백적분포개변.결과:체외ATP결실모형건립,각실험조세포내ATP농도정시간의뢰성적하강(P＜0.05);ATP결실후,NRK52E세포내섬유형기동단백적량점증,차기동단백적취합정도수ATP결실시간연장이증가(P＜0.05);ATP결실후,ERM단백종세포골가해리진입포장,차ERM단백종세포골가적해리정도수ATP결실적정도적증가이증가(P＜0.05).결론:ATP결실후NRK52E세포골가중조가능여ERM단백적중분포상관.
