CAJ | 학술논문

目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人原代白血病细胞及K562细胞系的增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法将携带有野生型PTEN、绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染原代白血病细胞和K562细胞系.采用MTT法检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布;光镜和电镜下观察细胞形态;TUNEL等方法检测细胞增殖及凋亡;培养细胞集落并比较不同组间集落形成的数量;实时荧光定量PCR(FQ-PER)检测PTEN mRNA水平变化,Westernblotting检测PTEN蛋白水平变化.结果以感染复数为200转染后,与Ad-GFP相比,Ad-PTEN-GFP转染人白血病K562细胞系后,细胞增殖受抑,凋亡率增加,最大生长抑制率为35.2%,最大凋亡率为30.0%.细胞周期显示G1期阻滞,G0/G1期细胞比例增加[(54.9±2.51)% vs (78.5±4.13)%],G2/M期比例降低[(30.2±1.91)% vs (13.6±1.02)%](均P<0.05).结论过表达PTEN可以抑制白血病细胞增殖,促进细胞凋亡,并导致细胞周期阻滞在G0/G1期.
목적 탐토종류억제기인PTEN대인원대백혈병세포급K562세포계적증식、조망급세포주기적영향.방법 장휴대유야생형PTEN、록색형광단백적선병독(Ad-PTEN-GFP)급공재체선병독(Ad-GFP)전염원대백혈병세포화K562세포계.채용MTT법검측세포생장곡선;류식세포의검측세포조망솔화세포주기분포;광경화전경하관찰세포형태;TUNEL등방법검측세포증식급조망;배양세포집락병비교불동조간집락형성적수량;실시형광정량PCR(FQ-PER)검측PTEN mRNA수평변화,Westernblotting검측PTEN단백수평변화.결과 이감염복수위200전염후,여Ad-GFP상비,Ad-PTEN-GFP전염인백혈병K562세포계후,세포증식수억,조망솔증가,최대생장억제솔위35.2%,최대조망솔위30.0%.세포주기현시G1기조체,G0/G1기세포비례증가[(54.9±2.51)% vs (78.5±4.13)%],G2/M기비례강저[(30.2±1.91)% vs (13.6±1.02)%](균P<0.05).결론 과표체PTEN가이억제백혈병세포증식,촉진세포조망,병도치세포주기조체재G0/G1기.