军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2009年
4期
440-442
,共3页
胡金川%江朝光%董矜%李立青%邓心新%温新宇%王玲%田亚平
鬍金川%江朝光%董矜%李立青%鄧心新%溫新宇%王玲%田亞平
호금천%강조광%동긍%리립청%산심신%온신우%왕령%전아평
体外循环%基因表达%内参基因%管家基因%geNorm程序
體外循環%基因錶達%內參基因%管傢基因%geNorm程序
체외순배%기인표체%내삼기인%관가기인%geNorm정서
目的 筛选浅低温体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)手术前后基因表达变化研究的内参基因.方法 通过阅读文献选择基因表达研究中常用的11个管家基因(housekeeping genes,HKGe),采用Beacon Designer软件设计PCR引物;收集4例浅低温CPB辅助手术患者CPB前、体温最低点、CPB末以及术后1d、3d、7d的静脉血24份,提取总RNA,采用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR法检测各样品中11个HKGe的循环阚值;对所得循环阈值进行转换,采用geNonn程序对候选基因的表达稳定性和所需内参基因数量进行分析.结果 11个HKGs稳定性排序为:UBC<RPLP0<PGK1<18S-rRNA<PPIA<GAPDH<ACTB<TBP<B2M<EEF1A1/HPRT1;该研究需要的最佳内参基因数量为3个,即EEF1A1、HPRT1和B2M.结论 确定了浅低温CPB手术前后11个HKGs中表达稳定性高的EEF1A1、HPRT1和B2M等3个基因为该条件下基因表达研究的内参基因.
目的 篩選淺低溫體外循環(cardiopulmonary bypass,CPB)手術前後基因錶達變化研究的內參基因.方法 通過閱讀文獻選擇基因錶達研究中常用的11箇管傢基因(housekeeping genes,HKGe),採用Beacon Designer軟件設計PCR引物;收集4例淺低溫CPB輔助手術患者CPB前、體溫最低點、CPB末以及術後1d、3d、7d的靜脈血24份,提取總RNA,採用SYBR Green I實時熒光定量RT-PCR法檢測各樣品中11箇HKGe的循環闞值;對所得循環閾值進行轉換,採用geNonn程序對候選基因的錶達穩定性和所需內參基因數量進行分析.結果 11箇HKGs穩定性排序為:UBC<RPLP0<PGK1<18S-rRNA<PPIA<GAPDH<ACTB<TBP<B2M<EEF1A1/HPRT1;該研究需要的最佳內參基因數量為3箇,即EEF1A1、HPRT1和B2M.結論 確定瞭淺低溫CPB手術前後11箇HKGs中錶達穩定性高的EEF1A1、HPRT1和B2M等3箇基因為該條件下基因錶達研究的內參基因.
목적 사선천저온체외순배(cardiopulmonary bypass,CPB)수술전후기인표체변화연구적내삼기인.방법 통과열독문헌선택기인표체연구중상용적11개관가기인(housekeeping genes,HKGe),채용Beacon Designer연건설계PCR인물;수집4례천저온CPB보조수술환자CPB전、체온최저점、CPB말이급술후1d、3d、7d적정맥혈24빈,제취총RNA,채용SYBR Green I실시형광정량RT-PCR법검측각양품중11개HKGe적순배감치;대소득순배역치진행전환,채용geNonn정서대후선기인적표체은정성화소수내삼기인수량진행분석.결과 11개HKGs은정성배서위:UBC<RPLP0<PGK1<18S-rRNA<PPIA<GAPDH<ACTB<TBP<B2M<EEF1A1/HPRT1;해연구수요적최가내삼기인수량위3개,즉EEF1A1、HPRT1화B2M.결론 학정료천저온CPB수술전후11개HKGs중표체은정성고적EEF1A1、HPRT1화B2M등3개기인위해조건하기인표체연구적내삼기인.
