胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2011年
2期
132-137
,共6页
张涛%黄顺玲%孙克伟%谭德明
張濤%黃順玲%孫剋偉%譚德明
장도%황순령%손극위%담덕명
肝脏靶向性给药%小干扰RNA%TGF-β/Smad信号传导通路%基因转染
肝髒靶嚮性給藥%小榦擾RNA%TGF-β/Smad信號傳導通路%基因轉染
간장파향성급약%소간우RNA%TGF-β/Smad신호전도통로%기인전염
目的 比较抗TGF-β1 siRNA靶向性进入肝细胞的4种转染方式在抗肝损伤与纤维化及对TGF-β/Smad信号传导通路影响中的效果差异,并探讨各自的优劣.方法 已启动肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的50只模型鼠,随机分为模型对照组、尾静脉直接注射组、脂质体包裹组、流体动力学法组和肝动脉插管组,每组10只;将构建的TGF-β1 siRNA质粒分别通过尾静脉直接注射、脂质体包裹、流体动力学法、肝动脉插管等方式导入肝脏靶细胞;分别检测血清指标ALT、AST、HA;取肝组织,HE染色病理检测;RT-PCR技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β1和Smad3 mRNA表达;免疫组化技术检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β和Smad3蛋白表达.结果 抗TGF-β1 siRNA质粒经过以上4种导入方法转染入靶细胞,均能有效地阻断大鼠肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的传导(P<0.05);4种导入方法比较,肝动脉插管组与脂质体包裹组效果相当(P>0.05),优于尾静脉直接注射组及流体动力学法组(P<0.05),尾静脉直接注射组效果最差(P<0.05).结论 抗TGF-β1 siRNA质粒经肝动脉插管途径转染,是一种安全、高效的外源基因肝脏靶向导入转染方法.
目的 比較抗TGF-β1 siRNA靶嚮性進入肝細胞的4種轉染方式在抗肝損傷與纖維化及對TGF-β/Smad信號傳導通路影響中的效果差異,併探討各自的優劣.方法 已啟動肝組織中的TGF-β/Smad信號傳導通路的50隻模型鼠,隨機分為模型對照組、尾靜脈直接註射組、脂質體包裹組、流體動力學法組和肝動脈插管組,每組10隻;將構建的TGF-β1 siRNA質粒分彆通過尾靜脈直接註射、脂質體包裹、流體動力學法、肝動脈插管等方式導入肝髒靶細胞;分彆檢測血清指標ALT、AST、HA;取肝組織,HE染色病理檢測;RT-PCR技術檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原、TGF-β1和Smad3 mRNA錶達;免疫組化技術檢測Ⅰ、Ⅲ型膠原、TGF-β和Smad3蛋白錶達.結果 抗TGF-β1 siRNA質粒經過以上4種導入方法轉染入靶細胞,均能有效地阻斷大鼠肝組織中的TGF-β/Smad信號傳導通路的傳導(P<0.05);4種導入方法比較,肝動脈插管組與脂質體包裹組效果相噹(P>0.05),優于尾靜脈直接註射組及流體動力學法組(P<0.05),尾靜脈直接註射組效果最差(P<0.05).結論 抗TGF-β1 siRNA質粒經肝動脈插管途徑轉染,是一種安全、高效的外源基因肝髒靶嚮導入轉染方法.
목적 비교항TGF-β1 siRNA파향성진입간세포적4충전염방식재항간손상여섬유화급대TGF-β/Smad신호전도통로영향중적효과차이,병탐토각자적우렬.방법 이계동간조직중적TGF-β/Smad신호전도통로적50지모형서,수궤분위모형대조조、미정맥직접주사조、지질체포과조、류체동역학법조화간동맥삽관조,매조10지;장구건적TGF-β1 siRNA질립분별통과미정맥직접주사、지질체포과、류체동역학법、간동맥삽관등방식도입간장파세포;분별검측혈청지표ALT、AST、HA;취간조직,HE염색병리검측;RT-PCR기술검측Ⅰ、Ⅲ형효원、TGF-β1화Smad3 mRNA표체;면역조화기술검측Ⅰ、Ⅲ형효원、TGF-β화Smad3단백표체.결과 항TGF-β1 siRNA질립경과이상4충도입방법전염입파세포,균능유효지조단대서간조직중적TGF-β/Smad신호전도통로적전도(P<0.05);4충도입방법비교,간동맥삽관조여지질체포과조효과상당(P>0.05),우우미정맥직접주사조급류체동역학법조(P<0.05),미정맥직접주사조효과최차(P<0.05).결론 항TGF-β1 siRNA질립경간동맥삽관도경전염,시일충안전、고효적외원기인간장파향도입전염방법.