植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2011年
5期
482-485
,共4页
尹跃艳%董家红%程晓非%李婷婷%丁铭%方琦%张仲凯
尹躍豔%董傢紅%程曉非%李婷婷%丁銘%方琦%張仲凱
윤약염%동가홍%정효비%리정정%정명%방기%장중개
番茄环纹斑点病毒%核壳体蛋白%原核表达%血清学相关性
番茄環紋斑點病毒%覈殼體蛋白%原覈錶達%血清學相關性
번가배문반점병독%핵각체단백%원핵표체%혈청학상관성
番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是番茄斑萎病毒属的一个新种,对云南番茄、辣椒生产造成严重危害.用RT-PCR从感病番茄中扩增得到长度为837 bp TZSV的核壳体蛋白基因(N基因),将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组原核表达载体pET-TZSV-N,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分析表明,该载体高效表达33kDa的融合蛋白；以纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔制备TZSV核壳体蛋白(N蛋白)的多克隆抗体,间接酶联免疫测定(ID-ELISA)表明效价为1/6 000；Western blot分析表明,该抗血清能与西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)血清组的辣椒褪绿病毒(CaCV)反应,而与番茄斑萎病毒(TSWV)、凤仙花坏死斑病毒(INSV)无血清交叉反应,说明获得的抗血清能用于WS-MoV血清组成员的检测,TZSV属于WSMoV血清组成员.
番茄環紋斑點病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是番茄斑萎病毒屬的一箇新種,對雲南番茄、辣椒生產造成嚴重危害.用RT-PCR從感病番茄中擴增得到長度為837 bp TZSV的覈殼體蛋白基因(N基因),將其剋隆到原覈錶達載體pET-28a(+),穫得重組原覈錶達載體pET-TZSV-N,在大腸桿菌BL21中錶達,SDS-PAGE分析錶明,該載體高效錶達33kDa的融閤蛋白；以純化的融閤蛋白作為抗原免疫傢兔製備TZSV覈殼體蛋白(N蛋白)的多剋隆抗體,間接酶聯免疫測定(ID-ELISA)錶明效價為1/6 000；Western blot分析錶明,該抗血清能與西瓜銀色斑駁病毒(WSMoV)血清組的辣椒褪綠病毒(CaCV)反應,而與番茄斑萎病毒(TSWV)、鳳仙花壞死斑病毒(INSV)無血清交扠反應,說明穫得的抗血清能用于WS-MoV血清組成員的檢測,TZSV屬于WSMoV血清組成員.
번가배문반점병독(Tomato zonate spot virus,TZSV)시번가반위병독속적일개신충,대운남번가、랄초생산조성엄중위해.용RT-PCR종감병번가중확증득도장도위837 bp TZSV적핵각체단백기인(N기인),장기극륭도원핵표체재체pET-28a(+),획득중조원핵표체재체pET-TZSV-N,재대장간균BL21중표체,SDS-PAGE분석표명,해재체고효표체33kDa적융합단백；이순화적융합단백작위항원면역가토제비TZSV핵각체단백(N단백)적다극륭항체,간접매련면역측정(ID-ELISA)표명효개위1/6 000；Western blot분석표명,해항혈청능여서과은색반박병독(WSMoV)혈청조적랄초퇴록병독(CaCV)반응,이여번가반위병독(TSWV)、봉선화배사반병독(INSV)무혈청교차반응,설명획득적항혈청능용우WS-MoV혈청조성원적검측,TZSV속우WSMoV혈청조성원.
