生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2012年
3期
17-19
,共3页
刘文雯%李勇%廖思明%周兴%朱浩君%黄日波
劉文雯%李勇%廖思明%週興%硃浩君%黃日波
류문문%리용%료사명%주흥%주호군%황일파
肌肉特异性激酶%基因克隆%表达%纯化%重症肌无力
肌肉特異性激酶%基因剋隆%錶達%純化%重癥肌無力
기육특이성격매%기인극륭%표체%순화%중증기무력
目的:克隆小鼠肌肉特异性激酶( muscle - specific kinase,MuSK)基因,原核表达、纯化MuSK蛋白.方法:获取编号AY360453的小鼠肌肉特异性激酶的基因编码序列进行优化和合成,将得到的目的基因构建于大肠杆菌表达载体pQE30中,获得重组表达载体pQE30 - MuSK,转化至大肠杆菌菌株M15中表达,SDS - PAGE凝胶电泳检测是否有目的蛋白条带,MuSK酶联免疫分析试剂盒检测目的蛋白的免疫活性及其含量.结果:获得MuSK基因1.4kb片段,成功构建pQE30 - MuSK原核表达载体,MuSK蛋白在大肠杆菌中成功表达,相对分子质量约为48kDa,Elisa试剂盒测得样品中MuSK的含量约为8.2pmol/L.结论:利用分子克隆技术建立了MuSK基因的原核表达系统,为更深入的研究其在重症肌无力中的作用打下基础.
目的:剋隆小鼠肌肉特異性激酶( muscle - specific kinase,MuSK)基因,原覈錶達、純化MuSK蛋白.方法:穫取編號AY360453的小鼠肌肉特異性激酶的基因編碼序列進行優化和閤成,將得到的目的基因構建于大腸桿菌錶達載體pQE30中,穫得重組錶達載體pQE30 - MuSK,轉化至大腸桿菌菌株M15中錶達,SDS - PAGE凝膠電泳檢測是否有目的蛋白條帶,MuSK酶聯免疫分析試劑盒檢測目的蛋白的免疫活性及其含量.結果:穫得MuSK基因1.4kb片段,成功構建pQE30 - MuSK原覈錶達載體,MuSK蛋白在大腸桿菌中成功錶達,相對分子質量約為48kDa,Elisa試劑盒測得樣品中MuSK的含量約為8.2pmol/L.結論:利用分子剋隆技術建立瞭MuSK基因的原覈錶達繫統,為更深入的研究其在重癥肌無力中的作用打下基礎.
목적:극륭소서기육특이성격매( muscle - specific kinase,MuSK)기인,원핵표체、순화MuSK단백.방법:획취편호AY360453적소서기육특이성격매적기인편마서렬진행우화화합성,장득도적목적기인구건우대장간균표체재체pQE30중,획득중조표체재체pQE30 - MuSK,전화지대장간균균주M15중표체,SDS - PAGE응효전영검측시부유목적단백조대,MuSK매련면역분석시제합검측목적단백적면역활성급기함량.결과:획득MuSK기인1.4kb편단,성공구건pQE30 - MuSK원핵표체재체,MuSK단백재대장간균중성공표체,상대분자질량약위48kDa,Elisa시제합측득양품중MuSK적함량약위8.2pmol/L.결론:이용분자극륭기술건립료MuSK기인적원핵표체계통,위경심입적연구기재중증기무력중적작용타하기출.
