CAJ | 학술논문

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞变性损伤的保护及机制.方法用PC12细胞制作帕金森病细胞模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测暴露于梯度浓度VEGF165后细胞的活性;流式细胞术检测对照组、损伤组(单加6-OHDA)、VEGF组(单加VEGF165)和VEGF保护组(同时加6-OHDA和VEGF165)细胞凋亡率(每组5个样本);免疫印迹法检测PC12细胞VEGF165及其受体fms样酪氨酸激酶-1(Flt-1)、胎肝激酶-1(Flk-1)、神经纤毛蛋白-1(Nrp-1)的表达,并观察VEGF165及其受体中和抗体对VEGF165作用的影响.结果随着VEGF165的浓度增加到50～100 ng/ml时,PC12细胞吸光度由0.14±0.06逐步上升至0.35±0.08(P＜0.01),随后又稍下降;细胞凋亡率VEGF保护组(29.65%±6.63%)低于损伤组(57.10%±5.66%),但高于VEGF组(3.67%±1.51%)和对照组(4.76%±1.06%,P＜0.01);免疫印迹实验检测到PC12细胞有VEGF165及Flt-1和Nrp-1的表达,而未检测到Flk-1;抗VEGF165和抗Nrp-1中和抗体可阻断VEGF165的作用,而抗Flt-1抗体无作用.结论VEGF165可保护PC12细胞因6-OHDA造成的损伤,Nrp-1受体在其中发挥重要作用.
목적탐토혈관내피생장인자(VEGF)대6-간기다파알(6-OHDA)유도적PC12세포변성손상적보호급궤제.방법용PC12세포제작파금삼병세포모형,채용사갑기우담서람법검측폭로우제도농도VEGF165후세포적활성;류식세포술검측대조조、손상조(단가6-OHDA)、VEGF조(단가VEGF165)화VEGF보호조(동시가6-OHDA화VEGF165)세포조망솔(매조5개양본);면역인적법검측PC12세포VEGF165급기수체fms양락안산격매-1(Flt-1)、태간격매-1(Flk-1)、신경섬모단백-1(Nrp-1)적표체,병관찰VEGF165급기수체중화항체대VEGF165작용적영향.결과수착VEGF165적농도증가도50～100 ng/ml시,PC12세포흡광도유0.14±0.06축보상승지0.35±0.08(P＜0.01),수후우초하강;세포조망솔VEGF보호조(29.65%±6.63%)저우손상조(57.10%±5.66%),단고우VEGF조(3.67%±1.51%)화대조조(4.76%±1.06%,P＜0.01);면역인적실험검측도PC12세포유VEGF165급Flt-1화Nrp-1적표체,이미검측도Flk-1;항VEGF165화항Nrp-1중화항체가조단VEGF165적작용,이항Flt-1항체무작용.결론VEGF165가보호PC12세포인6-OHDA조성적손상,Nrp-1수체재기중발휘중요작용.