第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2004年
6期
482-485
,共4页
邱宗文%张锡林%徐文岳%郝宏兴%段建华%况明书%王英
邱宗文%張錫林%徐文嶽%郝宏興%段建華%況明書%王英
구종문%장석림%서문악%학굉흥%단건화%황명서%왕영
大劣按蚊%约氏疟原虫%前酚氧化酶基因(PPO4)%卵囊%Ca2+
大劣按蚊%約氏瘧原蟲%前酚氧化酶基因(PPO4)%卵囊%Ca2+
대렬안문%약씨학원충%전분양화매기인(PPO4)%란낭%Ca2+
目的观察约氏疟原虫感染对大劣按蚊前酚氧化酶(prophenoloxidase, PPO)基因转录的影响与卵囊黑化期间囊内Ca2+的变化,探讨疟原虫感染不易感蚊种时卵囊黑化的相关机制.方法分别在大劣按蚊吸血感染约氏疟原虫前与感染后1、2、3和5 d抽提蚊总RNA进行RT-PCR,PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳后扫描进行凝胶图像分析,并对所得数据进行统计学处理.在吸血感染后5、7、11和15 d解剖分离按蚊中肠,以荧光染料Fluo-3/Am作为卵囊内Ca2+指示剂,利用共聚焦扫描显微镜观察不同时期约氏疟原虫卵囊内Ca2+的分布及变化.结果吸血感染约氏疟原虫前大劣按蚊PPO4基因的RT-PCR扩增产物较少,但感染后明显增加(P<0.01),尤其在感染后1 d与2 d最为明显;约氏疟原虫未黑化卵囊内Ca2+为(137.15±7.02) nmol/L,完全黑化卵囊内Ca2+为(18.44±1.75) nmol/L、并在囊壁出现明显的钙沉着.结论吸血感染约氏疟原虫后大劣按蚊PPO4基因转录比感染前明显增强,黑化卵囊内Ca2+较未黑化卵囊明显减少,并有外排现象.
目的觀察約氏瘧原蟲感染對大劣按蚊前酚氧化酶(prophenoloxidase, PPO)基因轉錄的影響與卵囊黑化期間囊內Ca2+的變化,探討瘧原蟲感染不易感蚊種時卵囊黑化的相關機製.方法分彆在大劣按蚊吸血感染約氏瘧原蟲前與感染後1、2、3和5 d抽提蚊總RNA進行RT-PCR,PCR擴增產物經1%瓊脂糖凝膠電泳後掃描進行凝膠圖像分析,併對所得數據進行統計學處理.在吸血感染後5、7、11和15 d解剖分離按蚊中腸,以熒光染料Fluo-3/Am作為卵囊內Ca2+指示劑,利用共聚焦掃描顯微鏡觀察不同時期約氏瘧原蟲卵囊內Ca2+的分佈及變化.結果吸血感染約氏瘧原蟲前大劣按蚊PPO4基因的RT-PCR擴增產物較少,但感染後明顯增加(P<0.01),尤其在感染後1 d與2 d最為明顯;約氏瘧原蟲未黑化卵囊內Ca2+為(137.15±7.02) nmol/L,完全黑化卵囊內Ca2+為(18.44±1.75) nmol/L、併在囊壁齣現明顯的鈣沉著.結論吸血感染約氏瘧原蟲後大劣按蚊PPO4基因轉錄比感染前明顯增彊,黑化卵囊內Ca2+較未黑化卵囊明顯減少,併有外排現象.
목적관찰약씨학원충감염대대렬안문전분양화매(prophenoloxidase, PPO)기인전록적영향여란낭흑화기간낭내Ca2+적변화,탐토학원충감염불역감문충시란낭흑화적상관궤제.방법분별재대렬안문흡혈감염약씨학원충전여감염후1、2、3화5 d추제문총RNA진행RT-PCR,PCR확증산물경1%경지당응효전영후소묘진행응효도상분석,병대소득수거진행통계학처리.재흡혈감염후5、7、11화15 d해부분리안문중장,이형광염료Fluo-3/Am작위란낭내Ca2+지시제,이용공취초소묘현미경관찰불동시기약씨학원충란낭내Ca2+적분포급변화.결과흡혈감염약씨학원충전대렬안문PPO4기인적RT-PCR확증산물교소,단감염후명현증가(P<0.01),우기재감염후1 d여2 d최위명현;약씨학원충미흑화란낭내Ca2+위(137.15±7.02) nmol/L,완전흑화란낭내Ca2+위(18.44±1.75) nmol/L、병재낭벽출현명현적개침착.결론흡혈감염약씨학원충후대렬안문PPO4기인전록비감염전명현증강,흑화란낭내Ca2+교미흑화란낭명현감소,병유외배현상.
