江西医学院学报
江西醫學院學報
강서의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2005年
1期
24-27
,共4页
况海斌%方廉%徐斯凡%郑月慧%王晶磊
況海斌%方廉%徐斯凡%鄭月慧%王晶磊
황해빈%방렴%서사범%정월혜%왕정뢰
间质细胞%c-Fos%反义寡脱氧核苷酸%睾酮
間質細胞%c-Fos%反義寡脫氧覈苷痠%睪酮
간질세포%c-Fos%반의과탈양핵감산%고동
目的本研究拟通过反义技术观察c-fosASODNs对hCG诱导大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及睾酮合成过程中限速酶表达水平的变化,并探讨其作用机制.方法 (1)放射免疫方法研究c-fosASODNs对hCG诱导大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响.(2)用免疫组织化学方法观察离体大鼠间质细胞Fos蛋白的变化.(3)用RT-PCR法观察在睾酮合成过程中大鼠间质细胞P450C17mRNA表达水平的变化.结果 (1)1.2×10-2IU/mlhCG可显著性地增加间质细胞睾酮的分泌(P<0.01),并使c-Fos蛋白染色阳性的间质细胞百分率和P450 C17mRNA 表达水平显著性地升高(P<0.01).(2)c-fosASODNs呈剂量依赖性地抑制hCG诱导的离体间质细胞的睾酮分泌,同时使c-Fos蛋白染色阳性的间质细胞百分率下降,而无义tatODN没有相应作用.(3)当二丁酰cAMP与c-fosASODNs作用时可明显逆转c-fosASODNs对hCG诱导间质细胞睾酮分泌的抑制作用,同时c-Fos蛋白染色阳性的间质细胞百分率和P450 C17mRNA 表达又恢复至接近hCG刺激水平.(4)维拉帕米(10-6mol/L)对hCG诱导的大鼠间质细胞睾酮的分泌及c-Fos蛋白染色阳性的间质细胞百分率均未见明显改变.结论 c-fos参与hCG诱导大鼠间质细胞睾酮的分泌,其机制很可能是通过cAMP-PKA依赖性途径使c-fos癌基因表达增强,然后激活睾酮合成的关键酶-P450C17mRNA表达.
目的本研究擬通過反義技術觀察c-fosASODNs對hCG誘導大鼠睪汍間質細胞睪酮分泌及睪酮閤成過程中限速酶錶達水平的變化,併探討其作用機製.方法 (1)放射免疫方法研究c-fosASODNs對hCG誘導大鼠睪汍間質細胞睪酮分泌的影響.(2)用免疫組織化學方法觀察離體大鼠間質細胞Fos蛋白的變化.(3)用RT-PCR法觀察在睪酮閤成過程中大鼠間質細胞P450C17mRNA錶達水平的變化.結果 (1)1.2×10-2IU/mlhCG可顯著性地增加間質細胞睪酮的分泌(P<0.01),併使c-Fos蛋白染色暘性的間質細胞百分率和P450 C17mRNA 錶達水平顯著性地升高(P<0.01).(2)c-fosASODNs呈劑量依賴性地抑製hCG誘導的離體間質細胞的睪酮分泌,同時使c-Fos蛋白染色暘性的間質細胞百分率下降,而無義tatODN沒有相應作用.(3)噹二丁酰cAMP與c-fosASODNs作用時可明顯逆轉c-fosASODNs對hCG誘導間質細胞睪酮分泌的抑製作用,同時c-Fos蛋白染色暘性的間質細胞百分率和P450 C17mRNA 錶達又恢複至接近hCG刺激水平.(4)維拉帕米(10-6mol/L)對hCG誘導的大鼠間質細胞睪酮的分泌及c-Fos蛋白染色暘性的間質細胞百分率均未見明顯改變.結論 c-fos參與hCG誘導大鼠間質細胞睪酮的分泌,其機製很可能是通過cAMP-PKA依賴性途徑使c-fos癌基因錶達增彊,然後激活睪酮閤成的關鍵酶-P450C17mRNA錶達.
목적본연구의통과반의기술관찰c-fosASODNs대hCG유도대서고환간질세포고동분비급고동합성과정중한속매표체수평적변화,병탐토기작용궤제.방법 (1)방사면역방법연구c-fosASODNs대hCG유도대서고환간질세포고동분비적영향.(2)용면역조직화학방법관찰리체대서간질세포Fos단백적변화.(3)용RT-PCR법관찰재고동합성과정중대서간질세포P450C17mRNA표체수평적변화.결과 (1)1.2×10-2IU/mlhCG가현저성지증가간질세포고동적분비(P<0.01),병사c-Fos단백염색양성적간질세포백분솔화P450 C17mRNA 표체수평현저성지승고(P<0.01).(2)c-fosASODNs정제량의뢰성지억제hCG유도적리체간질세포적고동분비,동시사c-Fos단백염색양성적간질세포백분솔하강,이무의tatODN몰유상응작용.(3)당이정선cAMP여c-fosASODNs작용시가명현역전c-fosASODNs대hCG유도간질세포고동분비적억제작용,동시c-Fos단백염색양성적간질세포백분솔화P450 C17mRNA 표체우회복지접근hCG자격수평.(4)유랍파미(10-6mol/L)대hCG유도적대서간질세포고동적분비급c-Fos단백염색양성적간질세포백분솔균미견명현개변.결론 c-fos삼여hCG유도대서간질세포고동적분비,기궤제흔가능시통과cAMP-PKA의뢰성도경사c-fos암기인표체증강,연후격활고동합성적관건매-P450C17mRNA표체.
