昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2006年
6期
887-894
,共8页
杨婉莹%刘文权%邓小娟%段云%黄亚东%温硕洋%夏庆友%曹阳
楊婉瑩%劉文權%鄧小娟%段雲%黃亞東%溫碩洋%夏慶友%曹暘
양완형%류문권%산소연%단운%황아동%온석양%하경우%조양
黑腹果蝇%抗真菌肽%Drosomycin%同系物%免疫原性%抗真菌活性
黑腹果蠅%抗真菌肽%Drosomycin%同繫物%免疫原性%抗真菌活性
흑복과승%항진균태%Drosomycin%동계물%면역원성%항진균활성
通过黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin(Drs)及其同系物Drs-lC和Drs-lE的抗体制备及Western blotting 结果,分析了Drs同系物的免疫原性与其抗真菌活性的关系.研究采用了2种技术路线,分别将Drs、Drs-lC和Drs-lE基因构建成与细胞生长因子基因 afgf 融合的重组表达质粒 pET-afgf-Drs、pET-afgf-C和pET-afgf-E,以及通过基因同向串连获得重组表达质粒 pRSET-2Drs、-4Drs、-6Drs 和 pRSET-2E、-4E、-6E,并将这些重组表达质粒转化到BL21(DE3)plysS受体菌进行诱导表达.分离纯化后的融合蛋白afgf-Drs、afgf-C和afgf-E 以及串连蛋白 4 Drs、4 Drs-lE分别免疫小白鼠获得相应的抗血清.Western blotting免疫原性检测结果表明,Drs及其同系物与各自的抗血清具有强的免疫反应,同时相互间也有交叉免疫反应,提示它们具有相似的主要抗原决定簇,这些抗原决定簇可能与抗真菌活性无关.同系物之间抗真菌活性的差异可能来源于某些细微结构上的差异.
通過黑腹果蠅Drosophila melanogaster抗真菌肽Drosomycin(Drs)及其同繫物Drs-lC和Drs-lE的抗體製備及Western blotting 結果,分析瞭Drs同繫物的免疫原性與其抗真菌活性的關繫.研究採用瞭2種技術路線,分彆將Drs、Drs-lC和Drs-lE基因構建成與細胞生長因子基因 afgf 融閤的重組錶達質粒 pET-afgf-Drs、pET-afgf-C和pET-afgf-E,以及通過基因同嚮串連穫得重組錶達質粒 pRSET-2Drs、-4Drs、-6Drs 和 pRSET-2E、-4E、-6E,併將這些重組錶達質粒轉化到BL21(DE3)plysS受體菌進行誘導錶達.分離純化後的融閤蛋白afgf-Drs、afgf-C和afgf-E 以及串連蛋白 4 Drs、4 Drs-lE分彆免疫小白鼠穫得相應的抗血清.Western blotting免疫原性檢測結果錶明,Drs及其同繫物與各自的抗血清具有彊的免疫反應,同時相互間也有交扠免疫反應,提示它們具有相似的主要抗原決定簇,這些抗原決定簇可能與抗真菌活性無關.同繫物之間抗真菌活性的差異可能來源于某些細微結構上的差異.
통과흑복과승Drosophila melanogaster항진균태Drosomycin(Drs)급기동계물Drs-lC화Drs-lE적항체제비급Western blotting 결과,분석료Drs동계물적면역원성여기항진균활성적관계.연구채용료2충기술로선,분별장Drs、Drs-lC화Drs-lE기인구건성여세포생장인자기인 afgf 융합적중조표체질립 pET-afgf-Drs、pET-afgf-C화pET-afgf-E,이급통과기인동향천련획득중조표체질립 pRSET-2Drs、-4Drs、-6Drs 화 pRSET-2E、-4E、-6E,병장저사중조표체질립전화도BL21(DE3)plysS수체균진행유도표체.분리순화후적융합단백afgf-Drs、afgf-C화afgf-E 이급천련단백 4 Drs、4 Drs-lE분별면역소백서획득상응적항혈청.Western blotting면역원성검측결과표명,Drs급기동계물여각자적항혈청구유강적면역반응,동시상호간야유교차면역반응,제시타문구유상사적주요항원결정족,저사항원결정족가능여항진균활성무관.동계물지간항진균활성적차이가능래원우모사세미결구상적차이.
