上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2009年
2期
154-157
,共4页
郭尚春%陈欣%袁霆%张长青%王金武
郭尚春%陳訢%袁霆%張長青%王金武
곽상춘%진흔%원정%장장청%왕금무
骨髓间充质干细胞%成骨细胞%内皮细胞%细胞分化%细胞表面分子
骨髓間充質榦細胞%成骨細胞%內皮細胞%細胞分化%細胞錶麵分子
골수간충질간세포%성골세포%내피세포%세포분화%세포표면분자
目的 探索体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向成骨细胞和内皮细胞分化形成成骨细胞及内皮细胞共存体系的潜能和条件.方法 采用密度梯度离心法分离培养hMSCs,采用含30 mg/L内皮细胞生长添加剂的内皮细胞诱导液诱导1周,然后更换为含1×10-8 mol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸钠、30 μg/mL维生素C的成骨细胞诱导液继续诱导7～14 d.诱导前以只加10% FBS的HDMEM培养基作为对照.采用流式细胞术检测细胞表面分子,通过倒置显微镜观察细胞形态学变化.向成骨细胞诱导14 d后,采用茜素红染色观察钙结节形成.结果 经流式细胞术检测,诱导前分离培养的hMSCs表达CD90、CD105和CD44,不表达内皮细胞表面标志CD34和CD133,也不表达HLA-DR.诱导14 d后,hMSCs表面标志CD90和CD105的表达下降(P＜0.05),成骨细胞表面标志CD44和HLA-DR及内皮细胞表面标志CD34和CD133增加(P＜0.05).诱导过程中原先长梭形的细胞缩短,细胞出现分层.hMSCs向成骨细胞诱导14 d后,茜素红染色显示有钙结节形成.结论 hMSCs先后经内皮细胞诱导液和成骨细胞诱导液诱导,可在体外向内皮细胞和成骨细胞定向分化,形成内皮细胞和成骨细胞共存体系.
目的 探索體外誘導人骨髓間充質榦細胞(hMSCs)嚮成骨細胞和內皮細胞分化形成成骨細胞及內皮細胞共存體繫的潛能和條件.方法 採用密度梯度離心法分離培養hMSCs,採用含30 mg/L內皮細胞生長添加劑的內皮細胞誘導液誘導1週,然後更換為含1×10-8 mol/L地塞米鬆、10 mmol/L β-甘油燐痠鈉、30 μg/mL維生素C的成骨細胞誘導液繼續誘導7～14 d.誘導前以隻加10% FBS的HDMEM培養基作為對照.採用流式細胞術檢測細胞錶麵分子,通過倒置顯微鏡觀察細胞形態學變化.嚮成骨細胞誘導14 d後,採用茜素紅染色觀察鈣結節形成.結果 經流式細胞術檢測,誘導前分離培養的hMSCs錶達CD90、CD105和CD44,不錶達內皮細胞錶麵標誌CD34和CD133,也不錶達HLA-DR.誘導14 d後,hMSCs錶麵標誌CD90和CD105的錶達下降(P＜0.05),成骨細胞錶麵標誌CD44和HLA-DR及內皮細胞錶麵標誌CD34和CD133增加(P＜0.05).誘導過程中原先長梭形的細胞縮短,細胞齣現分層.hMSCs嚮成骨細胞誘導14 d後,茜素紅染色顯示有鈣結節形成.結論 hMSCs先後經內皮細胞誘導液和成骨細胞誘導液誘導,可在體外嚮內皮細胞和成骨細胞定嚮分化,形成內皮細胞和成骨細胞共存體繫.
목적 탐색체외유도인골수간충질간세포(hMSCs)향성골세포화내피세포분화형성성골세포급내피세포공존체계적잠능화조건.방법 채용밀도제도리심법분리배양hMSCs,채용함30 mg/L내피세포생장첨가제적내피세포유도액유도1주,연후경환위함1×10-8 mol/L지새미송、10 mmol/L β-감유린산납、30 μg/mL유생소C적성골세포유도액계속유도7～14 d.유도전이지가10% FBS적HDMEM배양기작위대조.채용류식세포술검측세포표면분자,통과도치현미경관찰세포형태학변화.향성골세포유도14 d후,채용천소홍염색관찰개결절형성.결과 경류식세포술검측,유도전분리배양적hMSCs표체CD90、CD105화CD44,불표체내피세포표면표지CD34화CD133,야불표체HLA-DR.유도14 d후,hMSCs표면표지CD90화CD105적표체하강(P＜0.05),성골세포표면표지CD44화HLA-DR급내피세포표면표지CD34화CD133증가(P＜0.05).유도과정중원선장사형적세포축단,세포출현분층.hMSCs향성골세포유도14 d후,천소홍염색현시유개결절형성.결론 hMSCs선후경내피세포유도액화성골세포유도액유도,가재체외향내피세포화성골세포정향분화,형성내피세포화성골세포공존체계.
