细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
6期
553-555
,共3页
柳晓金%李明才%郑晓璇%武燕%曾俍铭,%苏绍波
柳曉金%李明纔%鄭曉璇%武燕%曾俍銘,%囌紹波
류효금%리명재%정효선%무연%증량명,%소소파
白细胞介素-33%镍柱亲和层析%原核表达%重组
白細胞介素-33%鎳柱親和層析%原覈錶達%重組
백세포개소-33%얼주친화층석%원핵표체%중조
目的: 在大肠杆菌中表达具有生物学活性的白细胞介素-33(mIL-33).方法: 用PCR技术扩增小鼠IL-33成熟蛋白的编码区, 与原核表达载体pET-44连接, 构建pET-44-mIL-33表达载体, 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达, 镍柱亲和层析法纯化目的蛋白, SDS-PAGE分析表达产物, MTT法测定纯化IL-33的生物学活性.结果: 成功构建了pET-44-mIL-33原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达出可溶性mIL-33, SDS-PAGE分析纯化产物纯度为95%, 表达产量为95 mg/L.细胞增殖实验表明IL-33有抑制P815细胞增殖的活性.结论: 获得了有活性的重组IL-33蛋白纯品, 为后续功能研究奠定了基础.
目的: 在大腸桿菌中錶達具有生物學活性的白細胞介素-33(mIL-33).方法: 用PCR技術擴增小鼠IL-33成熟蛋白的編碼區, 與原覈錶達載體pET-44連接, 構建pET-44-mIL-33錶達載體, 轉化大腸桿菌BL21(DE3), IPTG誘導錶達, 鎳柱親和層析法純化目的蛋白, SDS-PAGE分析錶達產物, MTT法測定純化IL-33的生物學活性.結果: 成功構建瞭pET-44-mIL-33原覈錶達載體, 併在大腸桿菌中錶達齣可溶性mIL-33, SDS-PAGE分析純化產物純度為95%, 錶達產量為95 mg/L.細胞增殖實驗錶明IL-33有抑製P815細胞增殖的活性.結論: 穫得瞭有活性的重組IL-33蛋白純品, 為後續功能研究奠定瞭基礎.
목적: 재대장간균중표체구유생물학활성적백세포개소-33(mIL-33).방법: 용PCR기술확증소서IL-33성숙단백적편마구, 여원핵표체재체pET-44련접, 구건pET-44-mIL-33표체재체, 전화대장간균BL21(DE3), IPTG유도표체, 얼주친화층석법순화목적단백, SDS-PAGE분석표체산물, MTT법측정순화IL-33적생물학활성.결과: 성공구건료pET-44-mIL-33원핵표체재체, 병재대장간균중표체출가용성mIL-33, SDS-PAGE분석순화산물순도위95%, 표체산량위95 mg/L.세포증식실험표명IL-33유억제P815세포증식적활성.결론: 획득료유활성적중조IL-33단백순품, 위후속공능연구전정료기출.
