微创医学
微創醫學
미창의학
MINIMALLY INVASIVE MEDICINE JOURNAL
2011年
1期
4-9
,共6页
冯海娇%沈岳飞%罗小丹%罗彦妮
馮海嬌%瀋嶽飛%囉小丹%囉彥妮
풍해교%침악비%라소단%라언니
RNA干扰%神经干细胞%甲基磺酸敏感蛋白2%阳离子脂质体
RNA榦擾%神經榦細胞%甲基磺痠敏感蛋白2%暘離子脂質體
RNA간우%신경간세포%갑기광산민감단백2%양리자지질체
目的 建立有效的脂质体瞬时转染法,转染小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),沉默大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)内甲基磺酸敏感蛋白2(Methyl Methanesulfonate Sensitive 2,MMS2)的表达.方法 设计并化学合成针对MMS2基因的3对siRNA分子序列,采用阳离子脂质体法瞬时转染NSCs,运用实时荧光定量PCR检测NSCs内MMS2基因mRNA的表达.结果 MMS2-siRNA对大鼠 NSCs 内MMS2基因的沉默效果在转染后36 h达到最大抑制作用;3对特异性MMS2-siRNA序列均有效地抑制了MMS2基因的表达,沉默效率分别为siRNA_A(58±5)%、siRNA_B(64±6)%、siRNA_C(84±3)%,与空白对照组相比均存在显著性差异(P＜0.05);siRNA_C沉默效率最高.结论 靶向MMS2基因的siRNA分子片段可以有效地抑制NSCs内MMS2基因的表达,为后续相关研究提供实验方法.
目的 建立有效的脂質體瞬時轉染法,轉染小分子榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA),沉默大鼠神經榦細胞(neural stem cells,NSCs)內甲基磺痠敏感蛋白2(Methyl Methanesulfonate Sensitive 2,MMS2)的錶達.方法 設計併化學閤成針對MMS2基因的3對siRNA分子序列,採用暘離子脂質體法瞬時轉染NSCs,運用實時熒光定量PCR檢測NSCs內MMS2基因mRNA的錶達.結果 MMS2-siRNA對大鼠 NSCs 內MMS2基因的沉默效果在轉染後36 h達到最大抑製作用;3對特異性MMS2-siRNA序列均有效地抑製瞭MMS2基因的錶達,沉默效率分彆為siRNA_A(58±5)%、siRNA_B(64±6)%、siRNA_C(84±3)%,與空白對照組相比均存在顯著性差異(P＜0.05);siRNA_C沉默效率最高.結論 靶嚮MMS2基因的siRNA分子片段可以有效地抑製NSCs內MMS2基因的錶達,為後續相關研究提供實驗方法.
목적 건립유효적지질체순시전염법,전염소분자간우RNA(small interfering RNA,siRNA),침묵대서신경간세포(neural stem cells,NSCs)내갑기광산민감단백2(Methyl Methanesulfonate Sensitive 2,MMS2)적표체.방법 설계병화학합성침대MMS2기인적3대siRNA분자서렬,채용양리자지질체법순시전염NSCs,운용실시형광정량PCR검측NSCs내MMS2기인mRNA적표체.결과 MMS2-siRNA대대서 NSCs 내MMS2기인적침묵효과재전염후36 h체도최대억제작용;3대특이성MMS2-siRNA서렬균유효지억제료MMS2기인적표체,침묵효솔분별위siRNA_A(58±5)%、siRNA_B(64±6)%、siRNA_C(84±3)%,여공백대조조상비균존재현저성차이(P＜0.05);siRNA_C침묵효솔최고.결론 파향MMS2기인적siRNA분자편단가이유효지억제NSCs내MMS2기인적표체,위후속상관연구제공실험방법.
