CAJ | 학술논문

为研究着丝粒/动粒复合体蛋白(centromere/kinetochore complex protein-B,CENP-B)高表达和低表达在细胞周期调控中的作用,将全长CENP-B cDNA基因(cenpb)构建到pBI-EGFP真核表达载体上,获得正义和反义cenpb真核表达重组质粒,并转染HeLa-Tet-Off细胞.结果表明,正义质粒转染导致细胞产生巨型着丝粒/动粒复合体,细胞分裂几次后发生凋亡;转染反义质粒至HeLa-Tet-Off细胞,克隆筛选获得稳定表达反义cenpb的细胞株HACPB.HACPB细胞着丝粒/动粒复合体小、数量多,CENP-B表达量低;细胞周期延长,恶性表型降低,裸鼠致瘤能力降低,G2/M期向下一周期的G1期过渡发生延迟.细胞周期蛋白相关激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)、细胞周期蛋白、细胞周期蛋白相关激酶抑制剂(CDK inhibitors,CKIs)等的表达在某时相发生特异的变化.这些结果说明,CENP-B是维持着丝粒/动粒复合体正常结构和功能的必需组分,并参与细胞周期调控.
위연구착사립/동립복합체단백(centromere/kinetochore complex protein-B,CENP-B)고표체화저표체재세포주기조공중적작용,장전장CENP-B cDNA기인(cenpb)구건도pBI-EGFP진핵표체재체상,획득정의화반의cenpb진핵표체중조질립,병전염HeLa-Tet-Off세포.결과표명,정의질립전염도치세포산생거형착사립/동립복합체,세포분렬궤차후발생조망;전염반의질립지HeLa-Tet-Off세포,극륭사선획득은정표체반의cenpb적세포주HACPB.HACPB세포착사립/동립복합체소、수량다,CENP-B표체량저;세포주기연장,악성표형강저,라서치류능력강저,G2/M기향하일주기적G1기과도발생연지.세포주기단백상관격매(cyclin-dependent kinases,CDKs)、세포주기단백、세포주기단백상관격매억제제(CDK inhibitors,CKIs)등적표체재모시상발생특이적변화.저사결과설명,CENP-B시유지착사립/동립복합체정상결구화공능적필수조분,병삼여세포주기조공.