免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2007年
1期
1-4
,共4页
汤军桥%李美星%王树军%张惠珍%王颖%张勇%葛海良
湯軍橋%李美星%王樹軍%張惠珍%王穎%張勇%葛海良
탕군교%리미성%왕수군%장혜진%왕영%장용%갈해량
OVA66%肿瘤相关基因%基因芯片%侵袭
OVA66%腫瘤相關基因%基因芯片%侵襲
OVA66%종류상관기인%기인심편%침습
目的 分析转染OVA66基因WISH细胞的生物学特征变化,探讨该基因的功能.方法 采用脂质体方法将重组真核表达载体pcDNA3.1-OVA66转染正常人羊膜细胞系WISH,经G418稳定筛选、克隆和扩增.采用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光等方法检测目的基因及其蛋白的表达,通过电镜分析细胞超微结构,体外侵袭实验检测细胞生长特性和侵袭能力, 软琼脂克隆形成实验检测细胞的克隆性生长能力,并应用基因芯片技术检测相关基因差异表达.结果 RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1-OVA66细胞OVA66基因呈高表达;Western bloting显示OVA66蛋白处出现明显的条带;电镜检测表明该基因可明显增强WISH细胞增殖能力;体外侵袭实验显示,该基因可增强WISH细胞的侵袭转移能力;软琼脂克隆形成实验表明OVA66基因可以促进单克隆性生长能力;基因芯片提示,该基因高表达影响某些基因的异常表达.结论 提示OVA66基因高表达可促进细胞的增殖,利于肿瘤的侵袭和转移.
目的 分析轉染OVA66基因WISH細胞的生物學特徵變化,探討該基因的功能.方法 採用脂質體方法將重組真覈錶達載體pcDNA3.1-OVA66轉染正常人羊膜細胞繫WISH,經G418穩定篩選、剋隆和擴增.採用RT-PCR、Western blotting和免疫熒光等方法檢測目的基因及其蛋白的錶達,通過電鏡分析細胞超微結構,體外侵襲實驗檢測細胞生長特性和侵襲能力, 軟瓊脂剋隆形成實驗檢測細胞的剋隆性生長能力,併應用基因芯片技術檢測相關基因差異錶達.結果 RT-PCR檢測顯示,轉染pcDNA3.1-OVA66細胞OVA66基因呈高錶達;Western bloting顯示OVA66蛋白處齣現明顯的條帶;電鏡檢測錶明該基因可明顯增彊WISH細胞增殖能力;體外侵襲實驗顯示,該基因可增彊WISH細胞的侵襲轉移能力;軟瓊脂剋隆形成實驗錶明OVA66基因可以促進單剋隆性生長能力;基因芯片提示,該基因高錶達影響某些基因的異常錶達.結論 提示OVA66基因高錶達可促進細胞的增殖,利于腫瘤的侵襲和轉移.
목적 분석전염OVA66기인WISH세포적생물학특정변화,탐토해기인적공능.방법 채용지질체방법장중조진핵표체재체pcDNA3.1-OVA66전염정상인양막세포계WISH,경G418은정사선、극륭화확증.채용RT-PCR、Western blotting화면역형광등방법검측목적기인급기단백적표체,통과전경분석세포초미결구,체외침습실험검측세포생장특성화침습능력, 연경지극륭형성실험검측세포적극륭성생장능력,병응용기인심편기술검측상관기인차이표체.결과 RT-PCR검측현시,전염pcDNA3.1-OVA66세포OVA66기인정고표체;Western bloting현시OVA66단백처출현명현적조대;전경검측표명해기인가명현증강WISH세포증식능력;체외침습실험현시,해기인가증강WISH세포적침습전이능력;연경지극륭형성실험표명OVA66기인가이촉진단극륭성생장능력;기인심편제시,해기인고표체영향모사기인적이상표체.결론 제시OVA66기인고표체가촉진세포적증식,리우종류적침습화전이.
