复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2007年
3期
384-389
,共6页
刘瑞卿%金瑞良%王虹军%徐胜凤%曹健%淳于利娟%许云敏%王洪海
劉瑞卿%金瑞良%王虹軍%徐勝鳳%曹健%淳于利娟%許雲敏%王洪海
류서경%금서량%왕홍군%서성봉%조건%순우리연%허운민%왕홍해
结核分枝杆菌%L-组氨醇脱氢酶%NADH%L-组氨醇
結覈分枝桿菌%L-組氨醇脫氫酶%NADH%L-組氨醇
결핵분지간균%L-조안순탈경매%NADH%L-조안순
以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增hisD基因,构建pET-28a-HDH重组质粒;转化重组质粒到E.coli BL21(DE3)并诱导表达, 纯化可溶性的结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶(HDH),并对其性质进行研究,结果表明:重组结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶能以L-组氨醇和NAD+为底物催化L-组氨醇生成L-组氨酸;该酶的最适pH值为8.3,最适温度为45 ℃,比活力为1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+等对酶促反应有激活作用;底物NAD+和L-组氨醇的米氏常数分别为0.9765 mmol/L和2.755 μmol/L;25 ℃时重组蛋白的二级结构中有20.5%的α-螺旋,40.9%β-折叠,4.2%β-转角,34.3%无规卷曲.
以結覈分枝桿菌H37Rv基因組為模闆,擴增hisD基因,構建pET-28a-HDH重組質粒;轉化重組質粒到E.coli BL21(DE3)併誘導錶達, 純化可溶性的結覈分枝桿菌L-組氨醇脫氫酶(HDH),併對其性質進行研究,結果錶明:重組結覈分枝桿菌L-組氨醇脫氫酶能以L-組氨醇和NAD+為底物催化L-組氨醇生成L-組氨痠;該酶的最適pH值為8.3,最適溫度為45 ℃,比活力為1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+等對酶促反應有激活作用;底物NAD+和L-組氨醇的米氏常數分彆為0.9765 mmol/L和2.755 μmol/L;25 ℃時重組蛋白的二級結構中有20.5%的α-螺鏇,40.9%β-摺疊,4.2%β-轉角,34.3%無規捲麯.
이결핵분지간균H37Rv기인조위모판,확증hisD기인,구건pET-28a-HDH중조질립;전화중조질립도E.coli BL21(DE3)병유도표체, 순화가용성적결핵분지간균L-조안순탈경매(HDH),병대기성질진행연구,결과표명:중조결핵분지간균L-조안순탈경매능이L-조안순화NAD+위저물최화L-조안순생성L-조안산;해매적최괄pH치위8.3,최괄온도위45 ℃,비활력위1.788 U/mg;Mn2+,Ca2+,Zn2+,Co2+등대매촉반응유격활작용;저물NAD+화L-조안순적미씨상수분별위0.9765 mmol/L화2.755 μmol/L;25 ℃시중조단백적이급결구중유20.5%적α-라선,40.9%β-절첩,4.2%β-전각,34.3%무규권곡.
