临床检验杂志
臨床檢驗雜誌
림상검험잡지
2008年
3期
197-199
,共3页
严冰冰%虞涛%方华红%覃瑞%游上游
嚴冰冰%虞濤%方華紅%覃瑞%遊上遊
엄빙빙%우도%방화홍%담서%유상유
载脂蛋白E%单核苷酸多态性%实时荧光PCR
載脂蛋白E%單覈苷痠多態性%實時熒光PCR
재지단백E%단핵감산다태성%실시형광PCR
目的 建立实时荧光PCR进行apoE单核苷酸多态性(SNP)分析法,快速检测人栽脂蛋白E(apoE)等位基因.方法 以人apoE基因中的Cys112Arg为研究对象,用荧光染料SYBR Green Ⅰ标记PCR产物,通过熔解曲线分析结果,并进行SNP分型.用高保真DNA聚合酶提高SNP测定的特异性;通过DNA测序验证荧光定量PCR对apoE基因Cys112Arg分型结果的准确性.结果 每个样品设立2个检测管,利用下游引物P2和SNP检测引物P33、P44进行定量PCR反应,30份样品各自获得2种等位基因扩增产物的熔解曲线,通过熔解曲线的Tm值判读,在30份样本中,apoE基因型3/3、3/4分别有27例和3例,与PCR-RFLP及DNA测序结果一致.结论 建立的apoE等位基因分型法操作简便,结果准确,适合人外周血apoE等位基因的定性检测.
目的 建立實時熒光PCR進行apoE單覈苷痠多態性(SNP)分析法,快速檢測人栽脂蛋白E(apoE)等位基因.方法 以人apoE基因中的Cys112Arg為研究對象,用熒光染料SYBR Green Ⅰ標記PCR產物,通過鎔解麯線分析結果,併進行SNP分型.用高保真DNA聚閤酶提高SNP測定的特異性;通過DNA測序驗證熒光定量PCR對apoE基因Cys112Arg分型結果的準確性.結果 每箇樣品設立2箇檢測管,利用下遊引物P2和SNP檢測引物P33、P44進行定量PCR反應,30份樣品各自穫得2種等位基因擴增產物的鎔解麯線,通過鎔解麯線的Tm值判讀,在30份樣本中,apoE基因型3/3、3/4分彆有27例和3例,與PCR-RFLP及DNA測序結果一緻.結論 建立的apoE等位基因分型法操作簡便,結果準確,適閤人外週血apoE等位基因的定性檢測.
목적 건립실시형광PCR진행apoE단핵감산다태성(SNP)분석법,쾌속검측인재지단백E(apoE)등위기인.방법 이인apoE기인중적Cys112Arg위연구대상,용형광염료SYBR Green Ⅰ표기PCR산물,통과용해곡선분석결과,병진행SNP분형.용고보진DNA취합매제고SNP측정적특이성;통과DNA측서험증형광정량PCR대apoE기인Cys112Arg분형결과적준학성.결과 매개양품설립2개검측관,이용하유인물P2화SNP검측인물P33、P44진행정량PCR반응,30빈양품각자획득2충등위기인확증산물적용해곡선,통과용해곡선적Tm치판독,재30빈양본중,apoE기인형3/3、3/4분별유27례화3례,여PCR-RFLP급DNA측서결과일치.결론 건립적apoE등위기인분형법조작간편,결과준학,괄합인외주혈apoE등위기인적정성검측.
