中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2008年
3期
153-155,160
,共4页
胡小波%佘美华%苏泽红%许金华%曹朝晖
鬍小波%佘美華%囌澤紅%許金華%曹朝暉
호소파%사미화%소택홍%허금화%조조휘
酵母双杂交技术%Acrp30%2型糖尿病%蛋白质相互作用
酵母雙雜交技術%Acrp30%2型糖尿病%蛋白質相互作用
효모쌍잡교기술%Acrp30%2형당뇨병%단백질상호작용
目的 应用酵母双杂交系统筛选Acrp30相互作用蛋白质,探讨Acrp30的功能,为2型糖尿病的发病机制和疾病的蛋白质相互作用网络研究提供线索.方法 应用酵母双杂交技术,以pGBKT7-Acrp30为诱饵质粒筛选人胎肝cDNA文库,得到阳性克隆,反复验证,并对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析.选定其中一个克隆,分别就Acrp30的球状区gAcrp30和胶原区cAcrp30,构建诱饵质粒pGBKT7-gAcrp30和pGBKT7-cAcrp30,与选定的克隆再次进行酵母双杂交,从而确定是与Acrp30的哪个区段相互作用.结果 从人胎肝cDNA文库中筛选得到约20个阳性克隆,经测序和同源性分析得到7个不同的候选基因序列,其中一个是转甲状腺素(transthyretin, TTR),分析表明,与TTR相互作用的是Acrp30的胶原区.结论 应用酵母双杂交系统,共筛选得到7个不同的基因,其编码蛋白与Acrp30有相互作用,可能与糖代谢发病机制相关.并且Acrp30主要通过胶原区与其它蛋白相互作用发挥功能.
目的 應用酵母雙雜交繫統篩選Acrp30相互作用蛋白質,探討Acrp30的功能,為2型糖尿病的髮病機製和疾病的蛋白質相互作用網絡研究提供線索.方法 應用酵母雙雜交技術,以pGBKT7-Acrp30為誘餌質粒篩選人胎肝cDNA文庫,得到暘性剋隆,反複驗證,併對驗證後的暘性剋隆的外源性片段進行測序及同源性分析.選定其中一箇剋隆,分彆就Acrp30的毬狀區gAcrp30和膠原區cAcrp30,構建誘餌質粒pGBKT7-gAcrp30和pGBKT7-cAcrp30,與選定的剋隆再次進行酵母雙雜交,從而確定是與Acrp30的哪箇區段相互作用.結果 從人胎肝cDNA文庫中篩選得到約20箇暘性剋隆,經測序和同源性分析得到7箇不同的候選基因序列,其中一箇是轉甲狀腺素(transthyretin, TTR),分析錶明,與TTR相互作用的是Acrp30的膠原區.結論 應用酵母雙雜交繫統,共篩選得到7箇不同的基因,其編碼蛋白與Acrp30有相互作用,可能與糖代謝髮病機製相關.併且Acrp30主要通過膠原區與其它蛋白相互作用髮揮功能.
목적 응용효모쌍잡교계통사선Acrp30상호작용단백질,탐토Acrp30적공능,위2형당뇨병적발병궤제화질병적단백질상호작용망락연구제공선색.방법 응용효모쌍잡교기술,이pGBKT7-Acrp30위유이질립사선인태간cDNA문고,득도양성극륭,반복험증,병대험증후적양성극륭적외원성편단진행측서급동원성분석.선정기중일개극륭,분별취Acrp30적구상구gAcrp30화효원구cAcrp30,구건유이질립pGBKT7-gAcrp30화pGBKT7-cAcrp30,여선정적극륭재차진행효모쌍잡교,종이학정시여Acrp30적나개구단상호작용.결과 종인태간cDNA문고중사선득도약20개양성극륭,경측서화동원성분석득도7개불동적후선기인서렬,기중일개시전갑상선소(transthyretin, TTR),분석표명,여TTR상호작용적시Acrp30적효원구.결론 응용효모쌍잡교계통,공사선득도7개불동적기인,기편마단백여Acrp30유상호작용,가능여당대사발병궤제상관.병차Acrp30주요통과효원구여기타단백상호작용발휘공능.
