中药新药与临床药理
中藥新藥與臨床藥理
중약신약여림상약리
TRADITIONAL CHINESE DRUG RESEARCH&CLINICAL PHARMACOLOGY
2009年
5期
404-407
,共4页
张代娟%刘同美%刘江月%崔晓栋%郭军堂%王建英%叶笃筠
張代娟%劉同美%劉江月%崔曉棟%郭軍堂%王建英%葉篤筠
장대연%류동미%류강월%최효동%곽군당%왕건영%협독균
青心酮%动脉粥样硬化%Toll样受体4%载脂蛋白E基因敲除小鼠
青心酮%動脈粥樣硬化%Toll樣受體4%載脂蛋白E基因敲除小鼠
청심동%동맥죽양경화%Toll양수체4%재지단백E기인고제소서
目的 观察青心酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化病变的影响及其与平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号转导途径的关系.方法 取小鼠胸主动脉,进行平滑肌细胞、内皮细胞的原代培养,巨噬细胞RAW264.7细胞株传代培养.实验分4组,即空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的培养基,不加入任何药物),脂多糖组(LPS组)(加入等数量的培养基3 h,再加入LPS10 ng·mL-1刺激8 h),DHAP组(先加入溶有DHAP 1×10-7mol·L-1的培养基培养3 h,再加入LPS 10 ng·mL-1刺激8 h),辛伐他汀对照组(先加入溶有辛伐他汀5×10-7mol·L-1的培养基培养3 h,再加入LPS 10 ng·mL-1刺激8 h).收集各组细胞蛋白,应用Western-blot检测TLR4蛋白含量.收集上清液,用ELISA法检测TNF-α.取8周龄雄性ApoE(-/-)小鼠20只,随机分成两组,每组10只,模型对照组建立小鼠AS模型,青心酮治疗组经胃管灌注青心酮10 mg·kg-1·d-1.所有实验小鼠均饲以"西方类型膳食"饲料喂养12周.剪取主动脉根部行石蜡切片及HE染色,观察主动脉粥样硬化的病变情况.结果 青心酮组血管平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞TLR4蛋白含量均明显低于未处理组(P<0.01),但高于空白对照组;与辛伐他汀组比较无显著性差异;青心酮组TNF-α含量明显低于未处理组(P<0.01),但高于空白对照组;与辛伐他汀组比较,具有显著性差异(P<0.01);青心酮组AS病灶形成减少.结论 青心酮能够在一定程度上减少AS病灶的形成,可能是通过TLR4信号转导途径发挥作用的.
目的 觀察青心酮對載脂蛋白E基因敲除小鼠主動脈粥樣硬化病變的影響及其與平滑肌細胞、內皮細胞、巨噬細胞Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)信號轉導途徑的關繫.方法 取小鼠胸主動脈,進行平滑肌細胞、內皮細胞的原代培養,巨噬細胞RAW264.7細胞株傳代培養.實驗分4組,即空白對照組(正常細胞培養,加入等數量的培養基,不加入任何藥物),脂多糖組(LPS組)(加入等數量的培養基3 h,再加入LPS10 ng·mL-1刺激8 h),DHAP組(先加入溶有DHAP 1×10-7mol·L-1的培養基培養3 h,再加入LPS 10 ng·mL-1刺激8 h),辛伐他汀對照組(先加入溶有辛伐他汀5×10-7mol·L-1的培養基培養3 h,再加入LPS 10 ng·mL-1刺激8 h).收集各組細胞蛋白,應用Western-blot檢測TLR4蛋白含量.收集上清液,用ELISA法檢測TNF-α.取8週齡雄性ApoE(-/-)小鼠20隻,隨機分成兩組,每組10隻,模型對照組建立小鼠AS模型,青心酮治療組經胃管灌註青心酮10 mg·kg-1·d-1.所有實驗小鼠均飼以"西方類型膳食"飼料餵養12週.剪取主動脈根部行石蠟切片及HE染色,觀察主動脈粥樣硬化的病變情況.結果 青心酮組血管平滑肌細胞、內皮細胞、巨噬細胞TLR4蛋白含量均明顯低于未處理組(P<0.01),但高于空白對照組;與辛伐他汀組比較無顯著性差異;青心酮組TNF-α含量明顯低于未處理組(P<0.01),但高于空白對照組;與辛伐他汀組比較,具有顯著性差異(P<0.01);青心酮組AS病竈形成減少.結論 青心酮能夠在一定程度上減少AS病竈的形成,可能是通過TLR4信號轉導途徑髮揮作用的.
목적 관찰청심동대재지단백E기인고제소서주동맥죽양경화병변적영향급기여평활기세포、내피세포、거서세포Toll양수체4(Toll-like receptor 4,TLR4)신호전도도경적관계.방법 취소서흉주동맥,진행평활기세포、내피세포적원대배양,거서세포RAW264.7세포주전대배양.실험분4조,즉공백대조조(정상세포배양,가입등수량적배양기,불가입임하약물),지다당조(LPS조)(가입등수량적배양기3 h,재가입LPS10 ng·mL-1자격8 h),DHAP조(선가입용유DHAP 1×10-7mol·L-1적배양기배양3 h,재가입LPS 10 ng·mL-1자격8 h),신벌타정대조조(선가입용유신벌타정5×10-7mol·L-1적배양기배양3 h,재가입LPS 10 ng·mL-1자격8 h).수집각조세포단백,응용Western-blot검측TLR4단백함량.수집상청액,용ELISA법검측TNF-α.취8주령웅성ApoE(-/-)소서20지,수궤분성량조,매조10지,모형대조조건립소서AS모형,청심동치료조경위관관주청심동10 mg·kg-1·d-1.소유실험소서균사이"서방류형선식"사료위양12주.전취주동맥근부행석사절편급HE염색,관찰주동맥죽양경화적병변정황.결과 청심동조혈관평활기세포、내피세포、거서세포TLR4단백함량균명현저우미처리조(P<0.01),단고우공백대조조;여신벌타정조비교무현저성차이;청심동조TNF-α함량명현저우미처리조(P<0.01),단고우공백대조조;여신벌타정조비교,구유현저성차이(P<0.01);청심동조AS병조형성감소.결론 청심동능구재일정정도상감소AS병조적형성,가능시통과TLR4신호전도도경발휘작용적.
