CAJ | 학술논문

目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法.方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因--mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度.结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光.与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml.结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌.
목적:건립일충쾌속간편적기폐군단균분자검측방법.방법:운용배개도등온확증기술(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),설계일투인물특이성식별기폐군단균독력기인--mip기인적6개특수구역,재항온조건하,대8주기폐군단균화5주기타세균진행검측,병여보통PCR방법진행비대,험증해방법적특이성화령민도.결과:소유기폐군단균확증산물균산생육안가견적백색침정,이기타불동균주균불산생침정;가입형광염료smart green후,기폐군단균확증산물균산생강록색형광,기타균주정약형광.여보통PCR(검출한약위57.6 pg,)비,LAMP확증반응적령민도대100배좌우,기인조DNA검출한위576 fg,양성수양검출한위8 cfu/ml.결론:LAMP기술가재간역적실험배경중쾌속、특이、령민지검측기폐군단균.