山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2010年
19期
16-18
,共3页
陈国晓%匡幼林%翁小东%陈志远%祝恒成%江波涛%刘修恒
陳國曉%劻幼林%翁小東%陳誌遠%祝恆成%江波濤%劉脩恆
진국효%광유림%옹소동%진지원%축항성%강파도%류수항
4-1BBL%重组腺病毒%基因治疗
4-1BBL%重組腺病毒%基因治療
4-1BBL%중조선병독%기인치료
目的 构建4-1BBL基因重组腺病毒载体,为前列腺癌的免疫治疗奠定基础.方法 以质粒pcDNA3-m4-1BBL为模板,PCR法扩增出4-1BBL cDNA,并将其插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV-m4-1BBL,经Pme Ⅰ酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,挑选同源重组质粒,Pac Ⅰ酶切线性化后,转染HEK293细胞包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达,RT-PCR和Western blot法检测4-1BBL表达.结果 目的 基因经酶切分析,测序鉴定正确,RT-PCR和Western blot证实4-1BBL表达.结论 成功构建了含4-1BBL基因的腺病毒载体,该载体可用于前列腺癌的免疫治疗.
目的 構建4-1BBL基因重組腺病毒載體,為前列腺癌的免疫治療奠定基礎.方法 以質粒pcDNA3-m4-1BBL為模闆,PCR法擴增齣4-1BBL cDNA,併將其插入腺病毒穿梭質粒pAdTrack-CMV中構建成腺病毒穿梭質粒pAdTrackCMV-m4-1BBL,經Pme Ⅰ酶切線性化,與腺病毒骨架質粒pAdEasy-1共轉化大腸桿菌BJ5183,挑選同源重組質粒,Pac Ⅰ酶切線性化後,轉染HEK293細胞包裝成重組病毒顆粒,熒光顯微鏡觀察綠色熒光錶達,RT-PCR和Western blot法檢測4-1BBL錶達.結果 目的 基因經酶切分析,測序鑒定正確,RT-PCR和Western blot證實4-1BBL錶達.結論 成功構建瞭含4-1BBL基因的腺病毒載體,該載體可用于前列腺癌的免疫治療.
목적 구건4-1BBL기인중조선병독재체,위전렬선암적면역치료전정기출.방법 이질립pcDNA3-m4-1BBL위모판,PCR법확증출4-1BBL cDNA,병장기삽입선병독천사질립pAdTrack-CMV중구건성선병독천사질립pAdTrackCMV-m4-1BBL,경Pme Ⅰ매절선성화,여선병독골가질립pAdEasy-1공전화대장간균BJ5183,도선동원중조질립,Pac Ⅰ매절선성화후,전염HEK293세포포장성중조병독과립,형광현미경관찰록색형광표체,RT-PCR화Western blot법검측4-1BBL표체.결과 목적 기인경매절분석,측서감정정학,RT-PCR화Western blot증실4-1BBL표체.결론 성공구건료함4-1BBL기인적선병독재체,해재체가용우전렬선암적면역치료.
