四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2010年
3期
674-678
,共5页
酿酒酵母%钙调蛋白依赖性激酶%氧化胁迫应答
釀酒酵母%鈣調蛋白依賴性激酶%氧化脅迫應答
양주효모%개조단백의뢰성격매%양화협박응답
CMK2是酵母中和哺乳动物钙调蛋白激酶CaM kinasesⅡ同源的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,具有重要调控作用.本文利用PCR方法扩增含内源启动子的CMK2基因序列,克隆到pRS316上并在C末端连接6个组氨酸标签,构建真核表达载体,转化不同酵母进行表达,并通过免疫印迹鉴定.发现氧化胁迫后细胞中CMK2发生磷酸化.生长实验结果显示cmk2缺失的细胞对氧化胁迫非常敏感,而Δcmk2中转入pRS316- cmk2-HIS6可以部分恢复Δcmk2细胞对双氧水的敏感性.表明CMK2参与细胞氧化胁迫应答途径,并发挥正调控作用.
CMK2是酵母中和哺乳動物鈣調蛋白激酶CaM kinasesⅡ同源的一種絲氨痠/囌氨痠蛋白激酶,具有重要調控作用.本文利用PCR方法擴增含內源啟動子的CMK2基因序列,剋隆到pRS316上併在C末耑連接6箇組氨痠標籤,構建真覈錶達載體,轉化不同酵母進行錶達,併通過免疫印跡鑒定.髮現氧化脅迫後細胞中CMK2髮生燐痠化.生長實驗結果顯示cmk2缺失的細胞對氧化脅迫非常敏感,而Δcmk2中轉入pRS316- cmk2-HIS6可以部分恢複Δcmk2細胞對雙氧水的敏感性.錶明CMK2參與細胞氧化脅迫應答途徑,併髮揮正調控作用.
CMK2시효모중화포유동물개조단백격매CaM kinasesⅡ동원적일충사안산/소안산단백격매,구유중요조공작용.본문이용PCR방법확증함내원계동자적CMK2기인서렬,극륭도pRS316상병재C말단련접6개조안산표첨,구건진핵표체재체,전화불동효모진행표체,병통과면역인적감정.발현양화협박후세포중CMK2발생린산화.생장실험결과현시cmk2결실적세포대양화협박비상민감,이Δcmk2중전입pRS316- cmk2-HIS6가이부분회복Δcmk2세포대쌍양수적민감성.표명CMK2삼여세포양화협박응답도경,병발휘정조공작용.
