西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2010年
12期
2385-2393
,共9页
喻娜%郭新勇%焦天奇%祝建波
喻娜%郭新勇%焦天奇%祝建波
유나%곽신용%초천기%축건파
小拟南芥%ApHRD基因%烟草%抗旱性
小擬南芥%ApHRD基因%煙草%抗旱性
소의남개%ApHRD기인%연초%항한성
根据拟南芥(Arabidopsis thaliana)的HRD基因序列,采用PCR方法从新疆小拟南芥(A.pumila)中克隆了ApHRD基因,并构建了植物表达载体pBIN-ApHRD,通过农杆菌介导法转化烟草('NC89')获得转化植株,用PCR和RT-PCR法对转化烟草进行鉴定,并采用水分胁迫和PEG-6000模拟干旱进行抗旱性分析.结果显示:(1)克隆的新疆小拟南芥ApHRD基因与拟南芥AtHRD基因的核苷酸序列相似性为99.1%,对应氨基酸序列的同源性为98.37%,只有3个位点发生实义突变.(2)与野生型烟草植株相比,转ApHRD基因烟草植株主根粗壮,一级侧根较发达,移栽成活的植株生长快.(3)在水分胁迫和30%的PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,转ApHRD基因烟草的叶片相对含水量和PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均显著低于野生型烟草植株;与野生型植株相比,转ApHRD基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,复水后恢复快且较完全,在干旱胁迫过程中受到的伤害较轻,表现出了较强的抗旱特性.研究表明,在干旱胁迫条件下,转小拟南芥ApHRD基因烟草植株表现出了优良的生理和生长优势,显示出较强的抗旱性特征,ApHRD基因在抗旱基因工程方面具有较好的应用前景.
根據擬南芥(Arabidopsis thaliana)的HRD基因序列,採用PCR方法從新疆小擬南芥(A.pumila)中剋隆瞭ApHRD基因,併構建瞭植物錶達載體pBIN-ApHRD,通過農桿菌介導法轉化煙草('NC89')穫得轉化植株,用PCR和RT-PCR法對轉化煙草進行鑒定,併採用水分脅迫和PEG-6000模擬榦旱進行抗旱性分析.結果顯示:(1)剋隆的新疆小擬南芥ApHRD基因與擬南芥AtHRD基因的覈苷痠序列相似性為99.1%,對應氨基痠序列的同源性為98.37%,隻有3箇位點髮生實義突變.(2)與野生型煙草植株相比,轉ApHRD基因煙草植株主根粗壯,一級側根較髮達,移栽成活的植株生長快.(3)在水分脅迫和30%的PEG-6000模擬榦旱脅迫條件下,轉ApHRD基因煙草的葉片相對含水量和PSⅡ相對量子產率降低幅度、相對電導率和丙二醛含量的升高幅度均顯著低于野生型煙草植株;與野生型植株相比,轉ApHRD基因煙草植株葉片齣現萎蔫癥狀的時間較遲、程度較輕,複水後恢複快且較完全,在榦旱脅迫過程中受到的傷害較輕,錶現齣瞭較彊的抗旱特性.研究錶明,在榦旱脅迫條件下,轉小擬南芥ApHRD基因煙草植株錶現齣瞭優良的生理和生長優勢,顯示齣較彊的抗旱性特徵,ApHRD基因在抗旱基因工程方麵具有較好的應用前景.
근거의남개(Arabidopsis thaliana)적HRD기인서렬,채용PCR방법종신강소의남개(A.pumila)중극륭료ApHRD기인,병구건료식물표체재체pBIN-ApHRD,통과농간균개도법전화연초('NC89')획득전화식주,용PCR화RT-PCR법대전화연초진행감정,병채용수분협박화PEG-6000모의간한진행항한성분석.결과현시:(1)극륭적신강소의남개ApHRD기인여의남개AtHRD기인적핵감산서렬상사성위99.1%,대응안기산서렬적동원성위98.37%,지유3개위점발생실의돌변.(2)여야생형연초식주상비,전ApHRD기인연초식주주근조장,일급측근교발체,이재성활적식주생장쾌.(3)재수분협박화30%적PEG-6000모의간한협박조건하,전ApHRD기인연초적협편상대함수량화PSⅡ상대양자산솔강저폭도、상대전도솔화병이철함량적승고폭도균현저저우야생형연초식주;여야생형식주상비,전ApHRD기인연초식주협편출현위언증상적시간교지、정도교경,복수후회복쾌차교완전,재간한협박과정중수도적상해교경,표현출료교강적항한특성.연구표명,재간한협박조건하,전소의남개ApHRD기인연초식주표현출료우량적생리화생장우세,현시출교강적항한성특정,ApHRD기인재항한기인공정방면구유교호적응용전경.