CAJ | 학술논문

传统的微生物培养方法在反映叶面微生态信息上具有局限性,因此逐渐被分子生态学所代替,而获得高质量、大片段、无偏好的总DNA是研究叶面环境微生物的基础.本文采用改进的Sambrook法、CTAB法、改良的化学法以及试剂盒法对玉米生长初期、中期、末期的叶面微生物总DNA进行提取,并对4种方法提取的DNA片段的大小和产量进行综合评价.将得到的DNA用引物357/518以及984/1387对细菌16S rDNA进行扩增；用5种常见引物NS1/fung、ITSl - F/ITS2、NS1/AM1、EF4/fung5、SSU - 0817/SSU - 1196对真菌18SrDNA进行扩增.结果表明:4种方法提取的DNA片段均适用于PCR,但DNA的得率和纯度有一定差别,其中以试剂盒提取效果最好.PCR结果显示,除化学法外,其他3种方法提取的DNA均能够获得目的条带；并通过比较得出引物984/1387对16S rDNA以及ITS1 - F/ITS2对18S rDNA扩增效果较好且扩增量最大.
전통적미생물배양방법재반영협면미생태신식상구유국한성,인차축점피분자생태학소대체,이획득고질량、대편단、무편호적총DNA시연구협면배경미생물적기출.본문채용개진적Sambrook법、CTAB법、개량적화학법이급시제합법대옥미생장초기、중기、말기적협면미생물총DNA진행제취,병대4충방법제취적DNA편단적대소화산량진행종합평개.장득도적DNA용인물357/518이급984/1387대세균16S rDNA진행확증；용5충상견인물NS1/fung、ITSl - F/ITS2、NS1/AM1、EF4/fung5、SSU - 0817/SSU - 1196대진균18SrDNA진행확증.결과표명:4충방법제취적DNA편단균괄용우PCR,단DNA적득솔화순도유일정차별,기중이시제합제취효과최호.PCR결과현시,제화학법외,기타3충방법제취적DNA균능구획득목적조대；병통과비교득출인물984/1387대16S rDNA이급ITS1 - F/ITS2대18S rDNA확증효과교호차확증량최대.