高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2003年
7期
25-28
,共4页
张擎%葛怡琛%潘瑞敏%徐培林
張擎%葛怡琛%潘瑞敏%徐培林
장경%갈이침%반서민%서배림
c-Mpl%配体%融合表达%纯化%活性测定
c-Mpl%配體%融閤錶達%純化%活性測定
c-Mpl%배체%융합표체%순화%활성측정
TPO是近年发现的血小板生成素,它通过与其受体c-Mpl的结合刺激巨核细胞的发生,调节动物或人体血小板的生成.利用酵母双杂交系统,以人体c-Mpl 受体作为诱饵蛋白,我们从人体肝脏cDNA文库筛选到另一与c-Mpl相结合的新配体,命名为XP1. 将xp1-cDNA构建到pET-28b大肠杆菌融合表达载体,经金属离子亲和层析柱和DEAE阴离子层析柱分离纯化,获得纯度为99%的His-XPI水溶性融合蛋白.表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性.结果表明:xp1基因在大肠杆菌中获得高效水溶性表达;其产物对小鼠骨髓细胞巨核细胞集落形成单位有明显的刺激作用.
TPO是近年髮現的血小闆生成素,它通過與其受體c-Mpl的結閤刺激巨覈細胞的髮生,調節動物或人體血小闆的生成.利用酵母雙雜交繫統,以人體c-Mpl 受體作為誘餌蛋白,我們從人體肝髒cDNA文庫篩選到另一與c-Mpl相結閤的新配體,命名為XP1. 將xp1-cDNA構建到pET-28b大腸桿菌融閤錶達載體,經金屬離子親和層析柱和DEAE陰離子層析柱分離純化,穫得純度為99%的His-XPI水溶性融閤蛋白.錶達產物利用小鼠巨覈細胞集落形成單位測定活性.結果錶明:xp1基因在大腸桿菌中穫得高效水溶性錶達;其產物對小鼠骨髓細胞巨覈細胞集落形成單位有明顯的刺激作用.
TPO시근년발현적혈소판생성소,타통과여기수체c-Mpl적결합자격거핵세포적발생,조절동물혹인체혈소판적생성.이용효모쌍잡교계통,이인체c-Mpl 수체작위유이단백,아문종인체간장cDNA문고사선도령일여c-Mpl상결합적신배체,명명위XP1. 장xp1-cDNA구건도pET-28b대장간균융합표체재체,경금속리자친화층석주화DEAE음리자층석주분리순화,획득순도위99%적His-XPI수용성융합단백.표체산물이용소서거핵세포집락형성단위측정활성.결과표명:xp1기인재대장간균중획득고효수용성표체;기산물대소서골수세포거핵세포집락형성단위유명현적자격작용.
