微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2004年
3期
324-327
,共4页
耐辐射球菌%大肠杆菌%pprI%H2O2%KatE
耐輻射毬菌%大腸桿菌%pprI%H2O2%KatE
내복사구균%대장간균%pprI%H2O2%KatE
将耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)与DNA修复有关的开关基因-pprI通过穿梭质粒pRADZ3导入大肠杆菌TG1中,使其在正常培养条件下(不需诱导剂)表达PprI蛋白,并通过Western blot证实该基因在TG1中可稳定表达.与转化了空白质粒pRADZ3 TG1对照,观察了改造后的两种大肠杆菌在有H2O2氧化压力下的存活率和大肠杆菌中两种过氧化氢酶(KatE, KatG)的活性表达差异.结果表明,无论在指数生长期还是稳定生长期,能表达PprI蛋白的大肠杆菌比对照的存活率要高出10%左右;非变性电泳结果表明,耐辐射球菌pprI 在大肠杆菌中的表达使得KatE活性在指数生长期与稳定生长期分别增加1.5～2倍和2.5～3倍.证明耐辐射球菌pprI 在大肠杆菌中的表达能够增强细胞抗氧化能力.
將耐輻射毬菌(Deinococcus radiodurans)與DNA脩複有關的開關基因-pprI通過穿梭質粒pRADZ3導入大腸桿菌TG1中,使其在正常培養條件下(不需誘導劑)錶達PprI蛋白,併通過Western blot證實該基因在TG1中可穩定錶達.與轉化瞭空白質粒pRADZ3 TG1對照,觀察瞭改造後的兩種大腸桿菌在有H2O2氧化壓力下的存活率和大腸桿菌中兩種過氧化氫酶(KatE, KatG)的活性錶達差異.結果錶明,無論在指數生長期還是穩定生長期,能錶達PprI蛋白的大腸桿菌比對照的存活率要高齣10%左右;非變性電泳結果錶明,耐輻射毬菌pprI 在大腸桿菌中的錶達使得KatE活性在指數生長期與穩定生長期分彆增加1.5～2倍和2.5～3倍.證明耐輻射毬菌pprI 在大腸桿菌中的錶達能夠增彊細胞抗氧化能力.
장내복사구균(Deinococcus radiodurans)여DNA수복유관적개관기인-pprI통과천사질립pRADZ3도입대장간균TG1중,사기재정상배양조건하(불수유도제)표체PprI단백,병통과Western blot증실해기인재TG1중가은정표체.여전화료공백질립pRADZ3 TG1대조,관찰료개조후적량충대장간균재유H2O2양화압력하적존활솔화대장간균중량충과양화경매(KatE, KatG)적활성표체차이.결과표명,무론재지수생장기환시은정생장기,능표체PprI단백적대장간균비대조적존활솔요고출10%좌우;비변성전영결과표명,내복사구균pprI 재대장간균중적표체사득KatE활성재지수생장기여은정생장기분별증가1.5～2배화2.5～3배.증명내복사구균pprI 재대장간균중적표체능구증강세포항양화능력.
