中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2007年
7期
782-785,790
,共5页
沈晗%袁瑷芹%张百芳%彭芳芳%武栋成
瀋晗%袁璦芹%張百芳%彭芳芳%武棟成
침함%원애근%장백방%팽방방%무동성
PC12细胞%野生型P53蛋白%PC12(P53R175H)细胞
PC12細胞%野生型P53蛋白%PC12(P53R175H)細胞
PC12세포%야생형P53단백%PC12(P53R175H)세포
目的 建立1种野生型P53蛋白失活的PC12细胞系,为研究PC12细胞生理及病理过程中P53蛋白的功能奠定基础.方法 将包含失活突变型p53基因片段P53R175H(其翻译所得P53蛋白的第175位氨基酸Arg被His替换)的缺陷型逆转录病毒质粒包装成具有侵袭能力的逆转录病毒,感染处于对数生长期的PC12细胞,经过嘌呤霉素筛选出稳定转染的PC12细胞,利用Western blotting及细胞生长曲线检测对该细胞进行初步鉴定.结果 利用嘌呤霉素成功筛选出转染成功的PC12细胞,并发现该细胞在神经生长因子(NGF)处理后,P21蛋白(P53蛋白直接活化的下游蛋白)未见明显表达,且其增殖能力虽有轻度下降,但仍远高于NGF处理的正常PC12细胞.结论 成功建立了野生型P53蛋白失活的PC12细胞系PC12(P53R175H),并鉴定了该细胞在缺失野生型P53蛋白情况下对NGF作用的反应,为探讨P53在PC12细胞中的功能提供了很好的研究工具.
目的 建立1種野生型P53蛋白失活的PC12細胞繫,為研究PC12細胞生理及病理過程中P53蛋白的功能奠定基礎.方法 將包含失活突變型p53基因片段P53R175H(其翻譯所得P53蛋白的第175位氨基痠Arg被His替換)的缺陷型逆轉錄病毒質粒包裝成具有侵襲能力的逆轉錄病毒,感染處于對數生長期的PC12細胞,經過嘌呤黴素篩選齣穩定轉染的PC12細胞,利用Western blotting及細胞生長麯線檢測對該細胞進行初步鑒定.結果 利用嘌呤黴素成功篩選齣轉染成功的PC12細胞,併髮現該細胞在神經生長因子(NGF)處理後,P21蛋白(P53蛋白直接活化的下遊蛋白)未見明顯錶達,且其增殖能力雖有輕度下降,但仍遠高于NGF處理的正常PC12細胞.結論 成功建立瞭野生型P53蛋白失活的PC12細胞繫PC12(P53R175H),併鑒定瞭該細胞在缺失野生型P53蛋白情況下對NGF作用的反應,為探討P53在PC12細胞中的功能提供瞭很好的研究工具.
목적 건립1충야생형P53단백실활적PC12세포계,위연구PC12세포생리급병리과정중P53단백적공능전정기출.방법 장포함실활돌변형p53기인편단P53R175H(기번역소득P53단백적제175위안기산Arg피His체환)적결함형역전록병독질립포장성구유침습능력적역전록병독,감염처우대수생장기적PC12세포,경과표령매소사선출은정전염적PC12세포,이용Western blotting급세포생장곡선검측대해세포진행초보감정.결과 이용표령매소성공사선출전염성공적PC12세포,병발현해세포재신경생장인자(NGF)처리후,P21단백(P53단백직접활화적하유단백)미견명현표체,차기증식능력수유경도하강,단잉원고우NGF처리적정상PC12세포.결론 성공건립료야생형P53단백실활적PC12세포계PC12(P53R175H),병감정료해세포재결실야생형P53단백정황하대NGF작용적반응,위탐토P53재PC12세포중적공능제공료흔호적연구공구.
