中国热带医学
中國熱帶醫學
중국열대의학
CHINA TROPICAL MEDICINE
2007年
11期
1979-1982
,共4页
Osteostat%肿瘤坏死因子超家族%重叠延伸PCR%克隆%表达
Osteostat%腫瘤壞死因子超傢族%重疊延伸PCR%剋隆%錶達
Osteostat%종류배사인자초가족%중첩연신PCR%극륭%표체
目的 采用基因工程的手段研制人Osteostat胞外蛋白,通过大肠杆菌偏嗜性人Osteostat胞外段编码基因的克隆,为重组蛋白的研发作初步准备.方法 按照氨基酸密码子的简并性原则将人Osteostat胞外段编码系列全部替换成大肠杆菌偏嗜性密码子,并将其分成三段扩增,再通过重叠延伸PCR将三个片段连接起来.然后,将回收的人Osteostat基因片段和pQE-30Xa表达载体相连,转化大肠杆菌感受态细胞,进行初步的诱导表达,表达产物行SDS-PAGE分析.结果 通过重叠延伸PCR获得了大肠杆菌偏嗜性的编码序列,通过测序验证了其序列的正确性.对重组表达载体转化菌进行诱导表达,SDS-PAGE分析证实获得预期分子量的目标蛋白.结论 大肠杆菌偏嗜性的人Osteostat胞外段编码基因表达载体的构建为重组蛋白的研发打下基础.
目的 採用基因工程的手段研製人Osteostat胞外蛋白,通過大腸桿菌偏嗜性人Osteostat胞外段編碼基因的剋隆,為重組蛋白的研髮作初步準備.方法 按照氨基痠密碼子的簡併性原則將人Osteostat胞外段編碼繫列全部替換成大腸桿菌偏嗜性密碼子,併將其分成三段擴增,再通過重疊延伸PCR將三箇片段連接起來.然後,將迴收的人Osteostat基因片段和pQE-30Xa錶達載體相連,轉化大腸桿菌感受態細胞,進行初步的誘導錶達,錶達產物行SDS-PAGE分析.結果 通過重疊延伸PCR穫得瞭大腸桿菌偏嗜性的編碼序列,通過測序驗證瞭其序列的正確性.對重組錶達載體轉化菌進行誘導錶達,SDS-PAGE分析證實穫得預期分子量的目標蛋白.結論 大腸桿菌偏嗜性的人Osteostat胞外段編碼基因錶達載體的構建為重組蛋白的研髮打下基礎.
목적 채용기인공정적수단연제인Osteostat포외단백,통과대장간균편기성인Osteostat포외단편마기인적극륭,위중조단백적연발작초보준비.방법 안조안기산밀마자적간병성원칙장인Osteostat포외단편마계렬전부체환성대장간균편기성밀마자,병장기분성삼단확증,재통과중첩연신PCR장삼개편단련접기래.연후,장회수적인Osteostat기인편단화pQE-30Xa표체재체상련,전화대장간균감수태세포,진행초보적유도표체,표체산물행SDS-PAGE분석.결과 통과중첩연신PCR획득료대장간균편기성적편마서렬,통과측서험증료기서렬적정학성.대중조표체재체전화균진행유도표체,SDS-PAGE분석증실획득예기분자량적목표단백.결론 대장간균편기성적인Osteostat포외단편마기인표체재체적구건위중조단백적연발타하기출.
