西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2008年
3期
488-490,498
,共4页
苏晓通%梁平%丁生才%李靖%杨彤翰%李洪艳
囌曉通%樑平%丁生纔%李靖%楊彤翰%李洪豔
소효통%량평%정생재%리정%양동한%리홍염
RNA干扰%肝细胞癌%RT-PCR%Western Blotting%钙离子浓度
RNA榦擾%肝細胞癌%RT-PCR%Western Blotting%鈣離子濃度
RNA간우%간세포암%RT-PCR%Western Blotting%개리자농도
目的 研究shRNA干扰肝癌SK-Hep1细胞Kir6.2基因表达及对细胞内钙离子浓度的影响.方法 脂质体转染法将shRNA质粒戢体pGenesil-3共转染SK-Hepl细胞,实验分为SK组(未转染)、HK组(阴性对照)、K1组(干扰序列1)和K2组(干扰序列2).经G418筛选出单克隆培养,RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效序列.Flu04-AM孵育各组细胞,流式细胞仪检测荧光强度.结果 RT-PCR结果显示K1、K2组KJr6.2 mRNA的表达与HK、SK组比较均降低.K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均降低.K1和K2组钙离子浓度远远低于SK和HK组.结论 shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达.钙离子浓度显著降低.
目的 研究shRNA榦擾肝癌SK-Hep1細胞Kir6.2基因錶達及對細胞內鈣離子濃度的影響.方法 脂質體轉染法將shRNA質粒戢體pGenesil-3共轉染SK-Hepl細胞,實驗分為SK組(未轉染)、HK組(陰性對照)、K1組(榦擾序列1)和K2組(榦擾序列2).經G418篩選齣單剋隆培養,RT-PCR和Western Blotting分彆檢測Kir6.2 mRNA和蛋白的錶達,篩選齣抑製Kir6.2錶達的有效序列.Flu04-AM孵育各組細胞,流式細胞儀檢測熒光彊度.結果 RT-PCR結果顯示K1、K2組KJr6.2 mRNA的錶達與HK、SK組比較均降低.K1、K2組Kir6.2蛋白的量與HK、SK組比較均降低.K1和K2組鈣離子濃度遠遠低于SK和HK組.結論 shRNA抑製瞭肝癌細胞Kir6.2基因的錶達.鈣離子濃度顯著降低.
목적 연구shRNA간우간암SK-Hep1세포Kir6.2기인표체급대세포내개리자농도적영향.방법 지질체전염법장shRNA질립집체pGenesil-3공전염SK-Hepl세포,실험분위SK조(미전염)、HK조(음성대조)、K1조(간우서렬1)화K2조(간우서렬2).경G418사선출단극륭배양,RT-PCR화Western Blotting분별검측Kir6.2 mRNA화단백적표체,사선출억제Kir6.2표체적유효서렬.Flu04-AM부육각조세포,류식세포의검측형광강도.결과 RT-PCR결과현시K1、K2조KJr6.2 mRNA적표체여HK、SK조비교균강저.K1、K2조Kir6.2단백적량여HK、SK조비교균강저.K1화K2조개리자농도원원저우SK화HK조.결론 shRNA억제료간암세포Kir6.2기인적표체.개리자농도현저강저.
