江苏大学学报(医学版)
江囌大學學報(醫學版)
강소대학학보(의학판)
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2011年
2期
117-121
,共5页
高小焕%邵世和%段秀杰%谢立苹
高小煥%邵世和%段秀傑%謝立蘋
고소환%소세화%단수걸%사립평
幽门螺杆菌%IV型分泌系统%同源重组%基因缺失
幽門螺桿菌%IV型分泌繫統%同源重組%基因缺失
유문라간균%IV형분비계통%동원중조%기인결실
目的:构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)IV型分泌系统cagX基因缺失株,为研究cagX基因的功能奠定基础.方法:利用基因同源重组原理,设计cagX基因上下游同源臂片段,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后酶切鉴定,将纯化后的同源臂片段连接到含卡那霉素抗性基因的载体pBluescript SKⅡ(-),即cagX基因自杀质粒pBlueKM40-ΔcagX;自杀质粒电击转化Hp NCTC 11637,通过卡那霉素筛选基因缺失株,后经 PCR和DNA测序鉴定.结果:构建成功了幽门螺杆菌cagX基因自杀质粒,并转化至Hp NCTC 11637内.结论:成功获得了幽门螺杆菌cagX基因缺失株Hp 11637-ΔcagX.
目的:構建幽門螺桿菌(H.pylori,Hp)IV型分泌繫統cagX基因缺失株,為研究cagX基因的功能奠定基礎.方法:利用基因同源重組原理,設計cagX基因上下遊同源臂片段,應用PCR擴增目的基因片段,TA剋隆後酶切鑒定,將純化後的同源臂片段連接到含卡那黴素抗性基因的載體pBluescript SKⅡ(-),即cagX基因自殺質粒pBlueKM40-ΔcagX;自殺質粒電擊轉化Hp NCTC 11637,通過卡那黴素篩選基因缺失株,後經 PCR和DNA測序鑒定.結果:構建成功瞭幽門螺桿菌cagX基因自殺質粒,併轉化至Hp NCTC 11637內.結論:成功穫得瞭幽門螺桿菌cagX基因缺失株Hp 11637-ΔcagX.
목적:구건유문라간균(H.pylori,Hp)IV형분비계통cagX기인결실주,위연구cagX기인적공능전정기출.방법:이용기인동원중조원리,설계cagX기인상하유동원비편단,응용PCR확증목적기인편단,TA극륭후매절감정,장순화후적동원비편단련접도함잡나매소항성기인적재체pBluescript SKⅡ(-),즉cagX기인자살질립pBlueKM40-ΔcagX;자살질립전격전화Hp NCTC 11637,통과잡나매소사선기인결실주,후경 PCR화DNA측서감정.결과:구건성공료유문라간균cagX기인자살질립,병전화지Hp NCTC 11637내.결론:성공획득료유문라간균cagX기인결실주Hp 11637-ΔcagX.