南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING MEDICAL UNIVERSITY
2001年
3期
182-185
,共4页
王立峰%范乐明%陈丙莺
王立峰%範樂明%陳丙鶯
왕립봉%범악명%진병앵
重组腺辅助病毒%载体制备%载体纯化
重組腺輔助病毒%載體製備%載體純化
중조선보조병독%재체제비%재체순화
目的:探讨一种制备、纯化重组腺辅助病毒(rAAV)载体的有效方法。方法:以质粒PDG和含有人apoAIcDNA的AAV载体共转染293T细胞,继以Iodixanol密度梯度离心结合肝素亲和层析法分离、纯化,斑点杂交鉴定rAAV病毒颗粒数;并以含人apoAIcDNA的rAAV感染C2C12细胞。结果:rAAV颗粒数为7×1010/ml;rAAV成功介导了人apoAIcDNA在C2C12细胞中的表达并持续了30天,在分化为肌管细胞后仍有此表达能力。结论:本实验采取的制备、纯化rAAV的方法简便、高效,rAAV成功介导apoAI基因在肌源性细胞C2C12中的表达。
目的:探討一種製備、純化重組腺輔助病毒(rAAV)載體的有效方法。方法:以質粒PDG和含有人apoAIcDNA的AAV載體共轉染293T細胞,繼以Iodixanol密度梯度離心結閤肝素親和層析法分離、純化,斑點雜交鑒定rAAV病毒顆粒數;併以含人apoAIcDNA的rAAV感染C2C12細胞。結果:rAAV顆粒數為7×1010/ml;rAAV成功介導瞭人apoAIcDNA在C2C12細胞中的錶達併持續瞭30天,在分化為肌管細胞後仍有此錶達能力。結論:本實驗採取的製備、純化rAAV的方法簡便、高效,rAAV成功介導apoAI基因在肌源性細胞C2C12中的錶達。
목적:탐토일충제비、순화중조선보조병독(rAAV)재체적유효방법。방법:이질립PDG화함유인apoAIcDNA적AAV재체공전염293T세포,계이Iodixanol밀도제도리심결합간소친화층석법분리、순화,반점잡교감정rAAV병독과립수;병이함인apoAIcDNA적rAAV감염C2C12세포。결과:rAAV과립수위7×1010/ml;rAAV성공개도료인apoAIcDNA재C2C12세포중적표체병지속료30천,재분화위기관세포후잉유차표체능력。결론:본실험채취적제비、순화rAAV적방법간편、고효,rAAV성공개도apoAI기인재기원성세포C2C12중적표체。