CAJ | 학술논문

目的:构建荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因标准品重组质粒和标准曲线,为建立实时荧光定量PCR准确检测淋巴系肿瘤微小残留病奠定基础.方法:对TCR VγI-¨基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针.提取急性淋巴细胞白血病患者的DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pMD 18-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒.结果:重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长,表明TCRVγI-Jγ基因已成功克隆.以100～10-5不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增,Ct值分别为21.08、24.34、27.53、30.58和33.25.统计学分析显示Ct值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,回归系数为0.998.结论:所构建的TCR VγI-Jγ基因荧光定量PCR检测标准品特异性和线性关系好,准确可靠,利于统一标准.
목적:구건형광정량PCR검측TCR VγI-Jγ기인표준품중조질립화표준곡선,위건립실시형광정량PCR준학검측림파계종류미소잔류병전정기출.방법:대TCR VγI-¨기인진행서렬분석,이용인물설계연건설계출일대인물화일조형광탐침.제취급성림파세포백혈병환자적DNA,경PCR확증,산물순화후여pMD 18-T Vector련접,전화도대장간균DH5α,사선득도표준품적질립.결과:중조질립진행형광정량PCR확증출현강렬적형광치증장,표명TCRVγI-Jγ기인이성공극륭.이100～10-5불동희석수평적표준품진행형광정량PCR확증,Ct치분별위21.08、24.34、27.53、30.58화33.25.통계학분석현시Ct치여표준품농도적대수존재량호선성관계,회귀계수위0.998.결론:소구건적TCR VγI-Jγ기인형광정량PCR검측표준품특이성화선성관계호,준학가고,리우통일표준.