热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2004年
3期
243-246
,共4页
韦相才%钟兴明%郑焕钦%陈观今
韋相纔%鐘興明%鄭煥欽%陳觀今
위상재%종흥명%정환흠%진관금
弓形虫%膜抗原%SAG3%基因打靶%载体
弓形蟲%膜抗原%SAG3%基因打靶%載體
궁형충%막항원%SAG3%기인타파%재체
目的探讨构建弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体的方法,为建立基因敲除弓形虫基因突变株打下基础.方法用PCR方法扩增弓形虫SAG3基因同源序列,将所获得的1.53kb和2.81kb序列连接克隆插入TUB5/CAT质粒中,构建置换型打靶载体,采用PCR扩增、酶切分析鉴定.结果将SAG3基因中1.53kb和2.81kb两个同源序列分别插入TUB5/CAT质粒中,构建了弓形虫RH株5'SAG3-TUB5/CAT-3'SAG3置换型载体,经鉴定所获得的打靶载体结构准确.结论建立了弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体,并获得了弓形虫RH株SAG3基因置换型打靶载体,为分析弓形虫基因功能提供了可行的方法.
目的探討構建弓形蟲膜抗原SAG3基因打靶載體的方法,為建立基因敲除弓形蟲基因突變株打下基礎.方法用PCR方法擴增弓形蟲SAG3基因同源序列,將所穫得的1.53kb和2.81kb序列連接剋隆插入TUB5/CAT質粒中,構建置換型打靶載體,採用PCR擴增、酶切分析鑒定.結果將SAG3基因中1.53kb和2.81kb兩箇同源序列分彆插入TUB5/CAT質粒中,構建瞭弓形蟲RH株5'SAG3-TUB5/CAT-3'SAG3置換型載體,經鑒定所穫得的打靶載體結構準確.結論建立瞭弓形蟲膜抗原SAG3基因打靶載體,併穫得瞭弓形蟲RH株SAG3基因置換型打靶載體,為分析弓形蟲基因功能提供瞭可行的方法.
목적탐토구건궁형충막항원SAG3기인타파재체적방법,위건립기인고제궁형충기인돌변주타하기출.방법용PCR방법확증궁형충SAG3기인동원서렬,장소획득적1.53kb화2.81kb서렬련접극륭삽입TUB5/CAT질립중,구건치환형타파재체,채용PCR확증、매절분석감정.결과장SAG3기인중1.53kb화2.81kb량개동원서렬분별삽입TUB5/CAT질립중,구건료궁형충RH주5'SAG3-TUB5/CAT-3'SAG3치환형재체,경감정소획득적타파재체결구준학.결론건립료궁형충막항원SAG3기인타파재체,병획득료궁형충RH주SAG3기인치환형타파재체,위분석궁형충기인공능제공료가행적방법.
