中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2004年
4期
451-456
,共6页
祁倩%饶恩于%王喆%刘华%凌启阆%李翠凤
祁倩%饒恩于%王喆%劉華%凌啟閬%李翠鳳
기천%요은우%왕철%류화%릉계랑%리취봉
CaMBP-10,非特异转脂蛋白(nsLTP),钙调素(CaM),钙调素结合蛋白(CaMBP),结合活性
CaMBP-10,非特異轉脂蛋白(nsLTP),鈣調素(CaM),鈣調素結閤蛋白(CaMBP),結閤活性
CaMBP-10,비특이전지단백(nsLTP),개조소(CaM),개조소결합단백(CaMBP),결합활성
采用RT-PCR法,从中国大白菜中分离了编码CaMBP-10的cDNA克隆.该cDNA全长496 bp,编码92个氨基酸,3′端含有216 bp的非编码区和poly-A尾.将此BP-10 cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET15b并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)Condonplus-RIL进行表达.以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP-10进行鉴定,证明其保持了与天然BP-10相同的钙调素结合活性.氨基酸和核苷酸序列分析结果显示,它与植物转脂蛋白高度同源,特别是含有8个保守半胱氨酸.BP-10与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等.据此认为,CaMBP-10是转脂蛋白家族的新成员,Ca2+/CaM信号系统可能参与植物转脂蛋白功能的调节.
採用RT-PCR法,從中國大白菜中分離瞭編碼CaMBP-10的cDNA剋隆.該cDNA全長496 bp,編碼92箇氨基痠,3′耑含有216 bp的非編碼區和poly-A尾.將此BP-10 cDNA的成熟蛋白序列導入錶達質粒pET15b併轉化至大腸桿菌E.coli BL21(DE3)Condonplus-RIL進行錶達.以免疫印跡和鈣調素結閤分析法對重組BP-10進行鑒定,證明其保持瞭與天然BP-10相同的鈣調素結閤活性.氨基痠和覈苷痠序列分析結果顯示,它與植物轉脂蛋白高度同源,特彆是含有8箇保守半胱氨痠.BP-10與轉脂蛋白之間具極為相似的理化性質如分子量、等電點、熱穩定性等.據此認為,CaMBP-10是轉脂蛋白傢族的新成員,Ca2+/CaM信號繫統可能參與植物轉脂蛋白功能的調節.
채용RT-PCR법,종중국대백채중분리료편마CaMBP-10적cDNA극륭.해cDNA전장496 bp,편마92개안기산,3′단함유216 bp적비편마구화poly-A미.장차BP-10 cDNA적성숙단백서렬도입표체질립pET15b병전화지대장간균E.coli BL21(DE3)Condonplus-RIL진행표체.이면역인적화개조소결합분석법대중조BP-10진행감정,증명기보지료여천연BP-10상동적개조소결합활성.안기산화핵감산서렬분석결과현시,타여식물전지단백고도동원,특별시함유8개보수반광안산.BP-10여전지단백지간구겁위상사적이화성질여분자량、등전점、열은정성등.거차인위,CaMBP-10시전지단백가족적신성원,Ca2+/CaM신호계통가능삼여식물전지단백공능적조절.
